【摘 要】
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目的 探讨Caspase-3特异性抑制剂对缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡的作用.方法将SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为3组:对照组、缺氧72h组,以及Caspase-3抑制剂组(缺氧72h前加入25μmol/L的z-DEVD-fmk 0.1μmol).应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化;借助Caspase-3荧光分析试剂盒,荧光比色法检测心肌
【机 构】
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215006,苏州大学附属第一医院心胸外科,215006,苏州大学附属第一医院心胸外科,苏州大学医学院药学系中药研究所,苏州大学医学院药学系中药研究所,苏州大学医学院基因研究室,苏州大学医学院基因研究
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目的 探讨Caspase-3特异性抑制剂对缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡的作用.方法将SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为3组:对照组、缺氧72h组,以及Caspase-3抑制剂组(缺氧72h前加入25μmol/L的z-DEVD-fmk 0.1μmol).应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法及流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化;借助Caspase-3荧光分析试剂盒,荧光比色法检测心肌细胞凋亡过程中Caspase-3活性的变化.结果 TUNEL及流式细胞术分析显示:Caspase-3抑制剂组AI值和细胞凋亡百分率分别为:(14.10(2.56)%,、(14.93±2.47)%与缺氧72?h组[(46.49±4.93)%、(48.43±4.18)%]相比明显降低并差异有显著性(P<0.01).Caspase-3活性检测显示:Caspase-3抑制剂组的Caspase-3活性明显降低比缺氧72h组降低了52.85%(P<0.01).结论 Caspase-3抑制剂能明显抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡.Caspase-3抑制剂能明显抑制Caspase-3蛋白酶活性。
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