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目的
探讨miRNA-143-3p对瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts, KFB)增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。
方法分离培养KFB和正常皮肤成纤维细胞(normal skin fibroblast，NFB)，RT-qPCR法检测KFB和NFB中miRNA-143-3p和整合素β5(integrin β5, ITGB5)的mRNA表达水平，Western blot检测ITGB5的蛋白质表达水平。MTT法、Transwell法、RT-qPCR和Western blot检测过表达miRNA-143-3p或抑制ITGB5表达对KFB细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白质表达的影响。双荧光素酶报告基因试验验证miRNA-143-3p和ITGB5的靶向关系。
结果与NFB相比较，KFB中miRNA-143-3p表达下调，ITGB5的mRNA和蛋白质表达水平上调。过表达miRNA-143-3p或抑制ITGB5表达均抑制了KFB的增殖、迁移和侵袭。miRNA-143-3p可负向调控ITGB5表达，ITGB5过表达逆转了miRNA-143-3p过表达对KFB增殖、迁移和侵袭的作用。
结论miRNA-143-3p通过下调ITGB5表达抑制KFB的增殖、迁移和侵袭。