CRISPR/Cas9介导敲除小鼠成纤维细胞MMP-2基因

来源 :中国兽医杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：GT454208911

【摘要】

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MMP-2 与蹄叶炎的发生密切相关。本试验通过 http://chopchop.cbu.uib.no/网站设计MMP-2的sgRNA,将sgRNA的合成物连接到经Esp3I限制性内切酶切割的lenticrispr v2载体上,构建

【作者】

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接金磊迟良张青青李鹏辉刘焕奇

【机构】

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青岛农业大学动物医学院

【出处】

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中国兽医杂志

【发表日期】

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2019年6期

【关键词】

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CRISPR/Cas9 MMP- 2 基因载体构建敲除 CRISPR/Cas9 MMP - 2 Gene Vector Construction Knock

【基金项目】

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青岛农业大学研究生创新计划项目(QYC201708),山东省现代农业产业技术体系创新团队项目(SDAIT-09-03).

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MMP-2 与蹄叶炎的发生密切相关。本试验通过 http://chopchop.cbu.uib.no/网站设计MMP-2的sgRNA,将sgRNA的合成物连接到经Esp3I限制性内切酶切割的lenticrispr v2载体上,构建完整敲除载体;并将该载体转染到小鼠成纤维细胞中,通过 Western Blot 检测 MMP-2 蛋白表达量。经菌液 PCR鉴定和PCR产物测序表明载体构建成功;Western Blot结果显示,基因敲除组的MMP-2蛋白表达量明显降低,表明成功敲除小鼠成纤维细胞中 MMP-2

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