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目的
探讨不同浓度大鼠感觉、运动神经匀浆提取液对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。
方法提取大鼠隐神经和坐骨神经肌支分别作为感觉、运动神经组织。按每10.0 mg组织加入1 mL成骨诱导液的比例,首先制备10.0 mg/mL神经匀浆,过滤提纯后10倍稀释,制备出1.0、0.1、0.01、0.001、0.000 1 mg/mL神经匀浆提取液。实验分为3组:体外培养绿色荧光蛋白阳性大鼠幼鼠BMSCs,常规培养至第3代后,感觉神经组(n=18)、运动神经组(n=18)分别加入以上6种浓度梯度的感觉、运动神经匀浆500 μL培养,对照组(n=3)加入500 μL成骨诱导培养基培养。14 d后行细胞增殖数量检测与碱性磷酸酶染色,观察BMSCs的增殖与成骨分化情况。
结果细胞增殖数量检测结果显示:感觉神经组1.0、0.1 mg/mL神经匀浆培养的细胞吸光度值(1.957±0.065、1.751±0.073)显著大于对照组(1.145±0.087),运动神经组10.0 mg/mL神经匀浆培养的细胞吸光度值(0.304±0.619)显著小于对照组(1.145±0.087),差异均有统计学意义(P< 0.05)。碱性磷酸酶染色结果显示:感觉神经组、运动神经组细胞钙结节数量(2.667±0.816、3.000±0.632)显著少于对照组细胞(11.833±1.471),差异均有统计学意义(P< 0.05)。
结论感觉神经区别于运动神经,在特定浓度范围内能够促进BMSCs增殖,并可能抑制其成骨分化。