探讨支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠肺及内脏感觉传入系统(C7~T5脊神经节及对应的脊髓后角)蛋白激酶C(PKC)的表达及神经生长因子(NGF)的调节作用.
方法40只豚鼠按随机数字表法分为4组:生理盐水对照组(A组)8只、单纯致敏对照组(B组)8只、哮喘组(C组)12只和NGF抗体组(D组)12只.用免疫组织化学方法检测各组豚鼠C7~T5脊神经节和对应的脊髓后角PKC的免疫反应变化;采用Western blot方法分别检测各组豚鼠肺组织、C7~T5脊神经节和对应的脊髓后角NGF与PKC的表达;采用Luzex-F实时图像分析系统和凝胶成像分析系统分别对以上结果进行图像分析.
结果(1) 免疫组织化学:A、B组豚鼠C7~T5脊神经节和对应的脊髓后角PKC的平均吸光度(A)值分别为0.102±0.009、0.113±0.009、0.106±0.005、0.116±0.007,二者比较差异无统计学意义 (P>0.05).C组豚鼠C7~T5脊神经节和对应的脊髓后角PKC的A值分别为0.215±0.014、0.176±0.010, C组与A组比较差异有统计学意义(P<0.01).D组豚鼠C7~T5脊神经节和对应的脊髓后角PKC的A值分别为0.140±0.008、0.130±0.011,D组与C组比较差异有统计学意义(P<0.01). (2) Western blot蛋白印迹:C组肺组织、C7~T5脊神经节神经元及相应脊髓节段PKC蛋白表达量(其A相对值分别为1.51±0.01、1.40±0.03、2.22±0.02)与A组(其A相对值分别为0.51±0.02、0.43±0.01、0.92±0.02)和B组比较均明显增加,而D组PKC蛋白表达量(其A相对值分别为0.80±0.03、0.83±0.01、1.12±0.02)明显低于C组.
结论PKC可能参与哮喘的发病过程,而NGF可上调哮喘豚鼠PKC的表达.