【摘 要】
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背景与目的:研究表明,人乳腺癌早期和病程中癌细胞脂肪酸合成酶( fatty acid synthase, FAS)呈高效表达.抑制 FAS可引起癌细胞凋亡.本研究采用酶促反应动力学实验观察三氯生
【机 构】
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解放军北京军医学院生物化学教研室,解放军北京军医学院专家组,Department of Biochemistry
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背景与目的:研究表明,人乳腺癌早期和病程中癌细胞脂肪酸合成酶( fatty acid synthase, FAS)呈高效表达.抑制 FAS可引起癌细胞凋亡.本研究采用酶促反应动力学实验观察三氯生对离体鹅尾臀腺 FAS的影响,建立实验方法,研究三氯生对人乳腺癌 SKBr3细胞 FAS的抑制作用.方法:运用超速离心和 Superdex PG 200层析技术分离纯化鹅尾臀腺 FAS,用超速离心技术部分纯化人乳腺癌 SKBr3细胞 FAS.不同浓度三氯生与 FAS相互作用不同时间后,加入底物,用分光光度法观察三氯生对 FAS的抑制作用.结果:在鹅尾臀腺组, FAS被纯化为 SDS-PAGE电泳单条区带(分子量 250 kDa),三种浓度三氯生 (12.5、 25.0、 100.0 μ mol/L)与 FAS在催化作用前相互作用 0、 5和 10 min,对 FAS的抑制率分别为 26.40%、 28.30%和 43.93%( 12.5 μ mol/L); 46.22%、 50.28%和 97.05%( 25 μ mol/L); 98.11%、 97.75%和 97.37%( 100 μ mol/L).在人乳腺癌 SKBr3细胞组 FAS被部分纯化, 25、 50、 100和 200 μ mol/L 三氯生分别与 FAS在催化前相互作用 5 min, 对 FAS活性的抑制率分别为 20.00%、 26.67%、 60.00% 和 100.00%.结论:三氯生对离体鹅尾臀腺 FAS和人乳腺癌 SKBr3细胞 FAS均具有抑制作用;作用强度既依赖于抑制剂浓度,又依赖于抑制剂与酶相互作用时间.
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