【摘 要】
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目的 在悬浮培养肌源性干细胞(MDSC)的基础上初步探讨集簇与分散培养对MDSC增殖活性的影响.方法 采取2周龄C57 BL/6小鼠四肢骨骼肌,用机械法与多步酶消化法制备细胞悬液进行
【机 构】
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中国医学科学院整形外科医院整形十六科,北京,100144
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目的 在悬浮培养肌源性干细胞(MDSC)的基础上初步探讨集簇与分散培养对MDSC增殖活性的影响.方法 采取2周龄C57 BL/6小鼠四肢骨骼肌,用机械法与多步酶消化法制备细胞悬液进行悬浮培养,在培养过程中分别吹打(分散培养组)与静置(集簇培养组).光镜观察与细胞计数统计增殖数量.流式细胞检测与分化实验验证细胞干性.结果 集簇培养组MDSC呈团簇状,细胞表面光滑,呈小球形,折光率高;分散培养组细胞呈单个或小团簇状,细胞表面光滑,小球形,高折光,偶见细胞皱缩.细胞计数结果显示悬浮集簇培养pp2细胞数量(4.0±0.5) ×105个,悬浮分散培养pp2细胞数量(4.2±0.7) ×105个,悬浮集簇培养pp6细胞数量(14.9±0.7) ×105个,悬浮分散培养pp6细胞数量(10.5±1.3) ×105个,分别增加至约3.7倍和2.5倍,悬浮集簇培养增殖量约是分散培养组的1.7倍,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞检测发现集簇培养表面干性标记物表达量更高.结论 悬浮集簇培养较分散培养获得细胞量更多,细胞干性更好.
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