【摘 要】
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目的建立一种无乙醇无苯酚的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺,并进行工艺验证。方法 5型肺炎球菌发酵培养液采用脱氧胆酸钠法去除蛋白质,再利用层析法去除核酸等杂质,并对蛋白质
【机 构】
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兰州生物制品研究所有限责任公司第一研究室 甘肃省疫苗工程技术研究中心;
【基金项目】
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国家科技重大专项重大新药创新(2018ZX09738-006)
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目的建立一种无乙醇无苯酚的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺,并进行工艺验证。方法 5型肺炎球菌发酵培养液采用脱氧胆酸钠法去除蛋白质,再利用层析法去除核酸等杂质,并对蛋白质去除工艺、层析工艺分别进行优化。采用优化后的方法纯化3批5型肺炎球菌发酵培养液,并对新工艺进行验证。结果 蛋白质去除工艺的最适参数为:脱氧胆酸钠浓度0.5%,pH 4.3;层析工艺的最佳条件为:氯化钠浓度200 mmol/L,pH 8.0,上样流速150 cm/h,多糖浓度0.50mg/mL。在上述工艺条件下,纯化的荚膜多糖各项指标均符合《欧洲药典》8.0版标准。结论 该工艺稳定、可靠,可用于大规模生产,相比传统的乙醇苯酚纯化工艺具有先进性。
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