人组织激肽释放酶在Pichia pastoris酵母中的表达

来源 :江苏农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qpowapian

【摘要】

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通过将人组织激肽释放酶（hKLK1）原编码序列克隆入Pichiapastoris酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组表达质粒pPIC9K-KLK1。分别用SalⅠ及BglⅡ酶切线性化后电转化酵母菌株GS1

【作者】

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王安平姚黎平孙怀昌

【机构】

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江苏畜牧兽医职业技术学院,扬州大学兽医学院

【出处】

：

江苏农业科学

【发表日期】

：

2009年6期

【关键词】

：

人组织激肽释放酶(hKLK1) PICHIA pastoris酵母表达条件重组菌株

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通过将人组织激肽释放酶（hKLK1）原编码序列克隆入Pichiapastoris酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得重组表达质粒pPIC9K-KLK1。分别用SalⅠ及BglⅡ酶切线性化后电转化酵母菌株GS115,经MD平板及含不同抗性浓度G418的YPD平板上培养筛选,获得抗3mg/mlG418Mut＋型分泌表达hKLK1的重组酵母菌4株,抗1mg/mlG418Muts型分泌表达hKLK1的酵母菌3株。酶活性测定数据表明：高拷贝转化子重组蛋白表达量高于低拷贝转化子;Mut＋型转化子重组蛋白表达量高于M

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