细菌内同源重组法制备mIL-12腺病毒载体及其体外高效表达

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利用细菌内同源重组法构建含mIL-12双顺反子重组腺病毒载体,其中由polio IRES连接的mIL-12 p40和p35双亚基目的基因片段用Not I+Xho Ⅰ酶自真核表达载体pcDNA3/mIL-12中切出,亚克隆至经同样酶切的腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒pAdtrack-CMV/mIL-12,对之线性化后与腺病毒基因组质粒pAdeasy-1共转化BJ5183菌,抽提经鉴定含目的基因的重组
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