【摘 要】
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以苏云金杆菌4.0718菌株杀虫晶体65kD原毒素为材料,探索了从SDS-P AGE胶上回收蛋白质进行质谱分析的方法.蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE、电洗脱、脱盐、除SDS.电洗脱采用半透
【机 构】
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华中农业大学微生物科学技术系,湖南师范大学生命科学学院
【基金项目】
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湖南省杰出青年科学基金，湖南省农业科技攻关项目
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以苏云金杆菌4.0718菌株杀虫晶体65kD原毒素为材料,探索了从SDS-P AGE胶上回收蛋白质进行质谱分析的方法.蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE、电洗脱、脱盐、除SDS.电洗脱采用半透膜法,用超滤法脱盐,冷丙酮沉淀法除去SDS.结果表明,纯化的65kD原毒素经E SI-MS检测,分子量约64500 Da.经MALDI-MS检测,未能有明显蛋白峰出现,这可能是该蛋白由于较强的疏水作用,溶解性差,在与基质混合时处于聚和悬浮态所致.
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