【摘 要】
：
目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法.方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水
【机 构】
：
重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室,第三军医大学分子跗学教研室
【基金项目】
：
重庆市科学技术委员会科技攻关项目;
论文部分内容阅读
目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法.方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度.结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40 法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度.结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR.
其他文献
目的 探讨体外循环(CPB)心内直视术围术期血清心型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein,HFABP)的变化规律和对术后心肌损伤早期检测的临床应用价值.方法 测定18
最近一段时间，我们班刮起一股“乒乓”风。每当下课铃一响，同学们就会取出事先准备好的乒乓球，把两张课桌拼凑在一起，中间夹几本书，就组成了一个简陋的球桌。它虽然不能和正规比赛
张景中，中国科学院院士，1936年12月生于河南省汝南县，现为计算机学科和数学学科博士生指导教师、中国科普作家协会理事长、广州大学计算机教育软件研究所所长、中国科学院成都计
目的 探讨彩色多普勒血流显像(color Doppler flow imaging,CDFI)在腹腔镜脾切除术(laparoscopic splenectomy,LS)中的作用.方法 选取2005-2007年间脾切除的患者30例,随机分
一年一度的国际吃热狗大赛在纽约科尼艾兰举行，上届冠军乔伊·切斯纳特以10分钟内吃下62个热狗的成绩蝉联男子组冠军，这也是他连续第五年夺冠。女子组比赛首次设立，冠军被索尼娅
肿瘤基因治疗的最大挑战之一是研制安全有效的基因转染载体.在基因转染载体中,非病毒载体以其低毒性、低免疫原性、低致瘤性及易于制备等优点具有良好的应用前景.本文以裸DNA
目的 探讨应用1972年Rothman首创并经过改进的一种更加微创、符合生理、满足患者生理要求的阴道再造手术方法.方法 于会阴部造穴,在腹腔镜辅助下应用腹膜再造阴道衬里,关闭盆
目的 探讨肝肾联合移植术后患者早期输液管理的方法及效果.方法 对8例肝肾联合移植术后患者在术后早期采用统筹规划、动态监测、特殊药物加强监控及严格血糖控制的强化输液管
目的:了解根管预备后疼痛发生率,并对一些可能与疼痛发生有关的因素进行分析.方法:选取2001年7月至2002年2月间武汉大学口腔医院牙体牙髓科完成的非一次法根管治疗纪录表,将
Graves眼病是甲状腺机能亢进症常见的并发症之一.多年来的临床经验表明,糖皮质激素及免疫抑制剂:氨甲蝶呤、环孢霉素A等对Graves眼病治疗有效,但存在着毒副作用大,长期用药,