【摘 要】
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目的 建立胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因过表达PC12细胞株并进行鉴定。方法 根据Gen Bank数据库中的CBS c DNA序列设计合成CBS基因引物,PCR扩增CBS基因,并将其克隆到慢病毒过表达
【机 构】
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中南大学基础医学院,南华大学医学院
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目的 建立胱硫醚-β-合成酶(CBS)基因过表达PC12细胞株并进行鉴定。方法 根据Gen Bank数据库中的CBS c DNA序列设计合成CBS基因引物,PCR扩增CBS基因,并将其克隆到慢病毒过表达载体GV341中,用慢病毒过表达载体连同两种包装病毒载体对293T细胞进行转染,收获含CBS慢病毒载体的上清液,用其感染正常的PC12细胞,用嘌呤霉素进行筛选得到CBS基因过表达PC12细胞株。用实时荧光定量PCR法检测所得PC12细胞(观察组)、空载体转染的PC12细胞(对照组)、正常PC12细胞(空白组
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