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【摘要】 将48只SD雄性大鼠随机分成正常组、模型组、通阳刮痧组、人参皂甙组(阳性对照组) ，运用悬吊冷水游泳复合应激的方法进行模型复制，观察通阳刮痧疗法对慢性疲劳大鼠行为学的影响并与人参皂甙组进行比较。通阳刮痧疗法能有效的干预CFS的行为学，可作为临床治疗CFS的有效方法。
【关键词】 慢性疲劳；通阳刮痧；行为学
慢性疲劳综合征（简称CFS）是指以极度疲劳，持续或反复发作6个月以上为主要表现，同时伴有低热、头痛、咽喉痛、肌痛、淋巴结肿大、神经精神症状等特异性症状的一组症候群[1] 。目前现代医学对CFS无特效的治疗方法，本实验运用导师（贵阳医学院针灸系吕明庄教授）自创的通阳刮痧疗法进行治疗，运用整体观念和辨证论治的理论探索防治CFS的有效方法。
1 材料与方法
材料：1）实验动物 选用SD健康大鼠48只，清洁级，体重200±20克，3－4月龄，雄性，室温控制在15-18℃，湿度在70%左右。2）实验器材 自制大鼠悬吊架，通阳刮痧工具，玻璃游泳池长120cm 、宽80cm 、高80cm，Morris水迷宫,人参皂甙。
2 方法
2.1 动物分组 造模前在同样光照条件下，给与标准饲料及清洁水，观察大鼠健康状况。将大鼠随机分成四组，即正常组、模型组、通阳刮痧组、人参皂甙组（阳性对照组）。适应性喂养一周后对大鼠进行Morris水迷宫游泳训练6天，第7天进行检测，检测完后开始造模。
2.2 动物模型的复制 造模采用悬吊冷水游泳复合应激的方法，①上午悬吊：在距老鼠尾根部约1cm处用打洞穿线，后将老鼠挂于悬吊架上，悬吊架距离地面1米，连续12天，每三天循序加量一次，时间分别为1 h 、 1.5 h 、 2h 、 2.5h[2]。②下午游泳：为冷水游泳，水温为10±1℃，游泳时间为7min[3]。
造模12天后观察大鼠的一般情况，并用Morris水迷宫、鼠尾悬挂、力竭游泳实验检测模型。其中Morris水迷宫在造模前一天进行一次检测。
2.3 治疗 从造模之日起开始对各治疗组进行治疗[4]。
2.3.1 通阳刮痧组 用刮痧工具按通阳刮痧疗法进行治疗。①老鼠固定俯卧位，剪去其背部毛，在背部均匀擦上按摩膏，用推刮工具沿着督脉的大椎→长强推刮，10-15次，以出痧为度。②沿背部脊椎两侧足太阳膀胱经第一侧线上进行推刮，10－15次，以出痧为度，可重点推刮肝俞、脾俞、肾俞。③在大鼠的腹部沿任脉的膻中→中脘→气海均匀缓慢推刮15次，不求出痧。④以上操作隔日一次，治疗12天，共6次，均由同一人进行操作。
2.3.2 人参皂甙组 将人参皂甙粉按70mg/（Kg·d）配制成水溶液进行灌胃，灌胃溶液为3ml，每天一次，治疗12天，共12次 [5]。
2.3.3 正常组与模型组 不做任何治疗，每天空抓一次。
2.4 行为学测定 Morris水迷宫实验：为圆桶形，底和周壁均为黑色，将平台放于第Ⅳ象限，将迷宫注水，水深约高过平台4cm，水温18℃。将每只大鼠按Ⅳ、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ象限顺序依次放入水迷宫，每次练习1分钟，电脑自动记录找到平台的时间。训练6天后，将平台撤走，用上述同样的方法测试，记录穿越第Ⅳ象限及找到平台位置的时间，主要检测大鼠的学习记忆情况。测定的指标为一分钟内大鼠找到平台所需的时间及所走的路径。
鼠尾悬挂实验[6]：在大鼠尾端1cm的部位进行打洞穿孔，将大鼠倒挂，离地面1m，大鼠为克服不正常的体位而挣扎活动，但活动一定时间后会出现间断性的不动状态，观察大鼠6min内的不动时间及挣扎的次数，用于测定大鼠体力情况及疲劳的程度。
力竭游泳实验[5-7]：水深50cm，水温为28±1℃。以大鼠从入水到游泳至头部沉入水中10秒不能浮出水面的时间为力竭时间，用于观察大鼠的体力情况。
2.5 统计学处理 数据用SPSS11.5统计软件进行分析，以平均值±标准差（x±S）表示，组间差异采用方差分析(ANOVA)。
3 结果
3.1 一般情况观察 正常组大鼠毛发光泽、顺滑，皮肤弹性好，眼睛有神，行动敏捷，自主活动佳。模型组则神态倦怠，眼神暗淡无光，毛发枯槁，皮肤弹性差，行动迟缓，自主活动明显减少。其余治疗组大鼠的上述表现较模型组均见良性逆转。 造模期间模型组大鼠死亡4只，通阳刮痧组死亡1只，人参皂甙组死亡3只。
3.2 各组大鼠行为学检测 各组大鼠力竭游泳时间及悬吊不动时间见表1， Morris水迷宮实验在造模（治疗）前后的结果见表2。
表1 各组大鼠力竭游泳时间及悬吊不动时间比较（Ｘ±S）
注：与正常组比较＃：P＜0.01 与模型组比较△：P＜0.01 与人参皂甙组比较▲：P＜0.05
从表1可见，造模后模型组与正常组比较，力竭游泳时间明显缩短，悬挂不动时间明显延长，表示体力及情绪活动出现明显异常。通阳刮痧组、人参皂甙组力竭游泳时间较模型组延长（P＜0.01），悬挂不动时间均缩短（P＜0.01），表示体力及情绪活动经治疗后得到显著改善。其中通阳刮痧组较人参皂甙组更为显著（P<0.05）。
表2 各组大鼠Morris水迷宫实验造模前后结果比较（Ｘ±S，S）
注：与造模前及正常组比较＃: P＜0.01 与模型组比较△: P＜0.01 与模型组比较＊: P＜0.05
从表2中可以看出造模前各组大鼠学习记忆成绩基本相等，无明显差异（P﹥0.05）。造模后模型组找到平台所需时间较造模前明显增加（P＜0.01），表示学习记忆出现明显障碍。治疗组找到平台所需时间较模型组均减少，表示学习记忆障碍通过治疗得到改善。其中通阳刮痧组找到平台所需时间较模型组明显减少（P<0.01）。由大鼠造模后模型组一般情况及以上行为学检测结果来看，本实验模型复制成功。
4 讨论
慢性疲劳综合征（CFS）是现代节奏紧张的生活方式下出现的一组以长期疲劳（包括体力疲劳和脑力疲劳）为突出表现的全身性症候群。Morris水迷宫实验是一种强迫实验动物（大鼠、小鼠）游泳，主要用于实验动物对于空间位置觉和方向觉（空间定位）的学习记忆能力，通过观察大鼠学习、记忆能力的情况来评价脑力疲劳状态，是学习与记忆研究的首选经典实验。鼠尾悬挂实验中动物的间断不动时间则能一定程度地反映动物的肌力、体力状态，也能反映动物的“失望”情绪及“抑郁”状态。常温下游泳至力竭的时间是反映动物体力及衡量动物是否疲劳的经典指标。因此，本实验除观察动物的一般情况外，还选择了一些评价动物体力、情绪、记忆力等的行为学指标。
由于CFS所表现出来的纷繁复杂的症状，在治疗时，不能单独按照某一种疾病的治法去选穴处方，需通盘考虑、选择能够包括尽可能多的症状的穴位或穴位的组合。导师在临床上重视手法研究，擅通调任督、巧用背俞，自创“通阳刮痧疗法”治疗CFS。
本实验在对大鼠进行通阳刮痧时，紧循“通阳刮痧疗法”的治疗原则及方法，但由于大鼠与人体的差异，运用通阳刮痧疗法对大鼠治疗时，在操作上无法像临床上进行走罐及拔罐，在刮痧工具的选择上也无临床上的具体。
大量研究表明[8]，人参具有促肾上腺皮质激素样和促性激素样作用，在应激过程中能明显提高机体的耐受力。从人参中提取的有效成分——人参皂甙，是目前比较公认的抗应激、抗疲劳的药物。故在本实验中，运用了人参皂甙作为阳性对照组。从实验结果中可看出，用人参皂甙治疗CFS，在一定的程度上能有效的缓解CFS的症状，但其与通阳刮痧疗法比较，通阳刮痧疗法更为有效。
“通阳刮痧疗法”功在调节，以通为用，起到了调整脏腑虚实、调和气血、通经活络、平衡阴阳的作用。“通阳刮痧疗法”的治疗原则更符合CFS为多脏器、多系统功能失调的这一发病机理。它不仅适合疾病人群，也可以应用于亚健康人群和健康人群中，具有广泛的应用前景。
参考文献
[1]CFS/ME Working Group. Report to Chief Medical Officer of an independent Working Group[M]. London: Department of Health, 2001.1～90.
[2]张晓抒,高祺. 慢性疲劳综合征临床研究进展. 辽宁中医杂志. 2006.12（33）：907
[3]刘玉棠,于玲. 慢性疲劳综合征中医药研究进展[J]. 山东中医杂志,2000 ,19 (9) :571
[4]杜宇征.慢性疲劳综合征的针灸治疗及研究进展.辽宁中医杂志.2006.12（33）：505～506
[5]张智君. 慢性疲劳综合征的流行特征与临床诊断[J].中华流行病杂志,2001,22(3) :229
[6]李永杰,王得新,张凤民,等. 中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV -p24 抗体的检测[J ]中华实验和临床病毒学杂志,2003 ,17 (4) :330
[7]喻方亭. 慢性疲劳综合征研究现状与中医治疗进展[J]. 中国中西医结合杂志,1995 ,15 (12) :751
[8]刘雁峰,王天芳,杨维益,等. 消疲怡神口服液治疗慢性疲劳综合征的临床研究[J]. 北京中医药大学学报,1999 ,22 (4) :56
图1：各组大鼠Morris水迷宫实验轨迹图
【关键词】 慢性疲劳；通阳刮痧；行为学
慢性疲劳综合征（简称CFS）是指以极度疲劳，持续或反复发作6个月以上为主要表现，同时伴有低热、头痛、咽喉痛、肌痛、淋巴结肿大、神经精神症状等特异性症状的一组症候群[1] 。目前现代医学对CFS无特效的治疗方法，本实验运用导师（贵阳医学院针灸系吕明庄教授）自创的通阳刮痧疗法进行治疗，运用整体观念和辨证论治的理论探索防治CFS的有效方法。
1 材料与方法
材料：1）实验动物 选用SD健康大鼠48只，清洁级，体重200±20克，3－4月龄，雄性，室温控制在15-18℃，湿度在70%左右。2）实验器材 自制大鼠悬吊架，通阳刮痧工具，玻璃游泳池长120cm 、宽80cm 、高80cm，Morris水迷宫,人参皂甙。
2 方法
2.1 动物分组 造模前在同样光照条件下，给与标准饲料及清洁水，观察大鼠健康状况。将大鼠随机分成四组，即正常组、模型组、通阳刮痧组、人参皂甙组（阳性对照组）。适应性喂养一周后对大鼠进行Morris水迷宫游泳训练6天，第7天进行检测，检测完后开始造模。
2.2 动物模型的复制 造模采用悬吊冷水游泳复合应激的方法，①上午悬吊：在距老鼠尾根部约1cm处用打洞穿线，后将老鼠挂于悬吊架上，悬吊架距离地面1米，连续12天，每三天循序加量一次，时间分别为1 h 、 1.5 h 、 2h 、 2.5h[2]。②下午游泳：为冷水游泳，水温为10±1℃，游泳时间为7min[3]。
造模12天后观察大鼠的一般情况，并用Morris水迷宫、鼠尾悬挂、力竭游泳实验检测模型。其中Morris水迷宫在造模前一天进行一次检测。
2.3 治疗 从造模之日起开始对各治疗组进行治疗[4]。
2.3.1 通阳刮痧组 用刮痧工具按通阳刮痧疗法进行治疗。①老鼠固定俯卧位，剪去其背部毛，在背部均匀擦上按摩膏，用推刮工具沿着督脉的大椎→长强推刮，10-15次，以出痧为度。②沿背部脊椎两侧足太阳膀胱经第一侧线上进行推刮，10－15次，以出痧为度，可重点推刮肝俞、脾俞、肾俞。③在大鼠的腹部沿任脉的膻中→中脘→气海均匀缓慢推刮15次，不求出痧。④以上操作隔日一次，治疗12天，共6次，均由同一人进行操作。
2.3.2 人参皂甙组 将人参皂甙粉按70mg/（Kg·d）配制成水溶液进行灌胃，灌胃溶液为3ml，每天一次，治疗12天，共12次 [5]。
2.3.3 正常组与模型组 不做任何治疗，每天空抓一次。
2.4 行为学测定 Morris水迷宫实验：为圆桶形，底和周壁均为黑色，将平台放于第Ⅳ象限，将迷宫注水，水深约高过平台4cm，水温18℃。将每只大鼠按Ⅳ、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ象限顺序依次放入水迷宫，每次练习1分钟，电脑自动记录找到平台的时间。训练6天后，将平台撤走，用上述同样的方法测试，记录穿越第Ⅳ象限及找到平台位置的时间，主要检测大鼠的学习记忆情况。测定的指标为一分钟内大鼠找到平台所需的时间及所走的路径。
鼠尾悬挂实验[6]：在大鼠尾端1cm的部位进行打洞穿孔，将大鼠倒挂，离地面1m，大鼠为克服不正常的体位而挣扎活动，但活动一定时间后会出现间断性的不动状态，观察大鼠6min内的不动时间及挣扎的次数，用于测定大鼠体力情况及疲劳的程度。
力竭游泳实验[5-7]：水深50cm，水温为28±1℃。以大鼠从入水到游泳至头部沉入水中10秒不能浮出水面的时间为力竭时间，用于观察大鼠的体力情况。
2.5 统计学处理 数据用SPSS11.5统计软件进行分析，以平均值±标准差（x±S）表示，组间差异采用方差分析(ANOVA)。
3 结果
3.1 一般情况观察 正常组大鼠毛发光泽、顺滑，皮肤弹性好，眼睛有神，行动敏捷，自主活动佳。模型组则神态倦怠，眼神暗淡无光，毛发枯槁，皮肤弹性差，行动迟缓，自主活动明显减少。其余治疗组大鼠的上述表现较模型组均见良性逆转。 造模期间模型组大鼠死亡4只，通阳刮痧组死亡1只，人参皂甙组死亡3只。
3.2 各组大鼠行为学检测 各组大鼠力竭游泳时间及悬吊不动时间见表1， Morris水迷宮实验在造模（治疗）前后的结果见表2。
表1 各组大鼠力竭游泳时间及悬吊不动时间比较（Ｘ±S）
注：与正常组比较＃：P＜0.01 与模型组比较△：P＜0.01 与人参皂甙组比较▲：P＜0.05
从表1可见，造模后模型组与正常组比较，力竭游泳时间明显缩短，悬挂不动时间明显延长，表示体力及情绪活动出现明显异常。通阳刮痧组、人参皂甙组力竭游泳时间较模型组延长（P＜0.01），悬挂不动时间均缩短（P＜0.01），表示体力及情绪活动经治疗后得到显著改善。其中通阳刮痧组较人参皂甙组更为显著（P<0.05）。
表2 各组大鼠Morris水迷宫实验造模前后结果比较（Ｘ±S，S）
注：与造模前及正常组比较＃: P＜0.01 与模型组比较△: P＜0.01 与模型组比较＊: P＜0.05
从表2中可以看出造模前各组大鼠学习记忆成绩基本相等，无明显差异（P﹥0.05）。造模后模型组找到平台所需时间较造模前明显增加（P＜0.01），表示学习记忆出现明显障碍。治疗组找到平台所需时间较模型组均减少，表示学习记忆障碍通过治疗得到改善。其中通阳刮痧组找到平台所需时间较模型组明显减少（P<0.01）。由大鼠造模后模型组一般情况及以上行为学检测结果来看，本实验模型复制成功。
4 讨论
慢性疲劳综合征（CFS）是现代节奏紧张的生活方式下出现的一组以长期疲劳（包括体力疲劳和脑力疲劳）为突出表现的全身性症候群。Morris水迷宫实验是一种强迫实验动物（大鼠、小鼠）游泳，主要用于实验动物对于空间位置觉和方向觉（空间定位）的学习记忆能力，通过观察大鼠学习、记忆能力的情况来评价脑力疲劳状态，是学习与记忆研究的首选经典实验。鼠尾悬挂实验中动物的间断不动时间则能一定程度地反映动物的肌力、体力状态，也能反映动物的“失望”情绪及“抑郁”状态。常温下游泳至力竭的时间是反映动物体力及衡量动物是否疲劳的经典指标。因此，本实验除观察动物的一般情况外，还选择了一些评价动物体力、情绪、记忆力等的行为学指标。
由于CFS所表现出来的纷繁复杂的症状，在治疗时，不能单独按照某一种疾病的治法去选穴处方，需通盘考虑、选择能够包括尽可能多的症状的穴位或穴位的组合。导师在临床上重视手法研究，擅通调任督、巧用背俞，自创“通阳刮痧疗法”治疗CFS。
本实验在对大鼠进行通阳刮痧时，紧循“通阳刮痧疗法”的治疗原则及方法，但由于大鼠与人体的差异，运用通阳刮痧疗法对大鼠治疗时，在操作上无法像临床上进行走罐及拔罐，在刮痧工具的选择上也无临床上的具体。
大量研究表明[8]，人参具有促肾上腺皮质激素样和促性激素样作用，在应激过程中能明显提高机体的耐受力。从人参中提取的有效成分——人参皂甙，是目前比较公认的抗应激、抗疲劳的药物。故在本实验中，运用了人参皂甙作为阳性对照组。从实验结果中可看出，用人参皂甙治疗CFS，在一定的程度上能有效的缓解CFS的症状，但其与通阳刮痧疗法比较，通阳刮痧疗法更为有效。
“通阳刮痧疗法”功在调节，以通为用，起到了调整脏腑虚实、调和气血、通经活络、平衡阴阳的作用。“通阳刮痧疗法”的治疗原则更符合CFS为多脏器、多系统功能失调的这一发病机理。它不仅适合疾病人群，也可以应用于亚健康人群和健康人群中，具有广泛的应用前景。
参考文献
[1]CFS/ME Working Group. Report to Chief Medical Officer of an independent Working Group[M]. London: Department of Health, 2001.1～90.
[2]张晓抒,高祺. 慢性疲劳综合征临床研究进展. 辽宁中医杂志. 2006.12（33）：907
[3]刘玉棠,于玲. 慢性疲劳综合征中医药研究进展[J]. 山东中医杂志,2000 ,19 (9) :571
[4]杜宇征.慢性疲劳综合征的针灸治疗及研究进展.辽宁中医杂志.2006.12（33）：505～506
[5]张智君. 慢性疲劳综合征的流行特征与临床诊断[J].中华流行病杂志,2001,22(3) :229
[6]李永杰,王得新,张凤民,等. 中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV -p24 抗体的检测[J ]中华实验和临床病毒学杂志,2003 ,17 (4) :330
[7]喻方亭. 慢性疲劳综合征研究现状与中医治疗进展[J]. 中国中西医结合杂志,1995 ,15 (12) :751
[8]刘雁峰,王天芳,杨维益,等. 消疲怡神口服液治疗慢性疲劳综合征的临床研究[J]. 北京中医药大学学报,1999 ,22 (4) :56
图1：各组大鼠Morris水迷宫实验轨迹图