【摘 要】
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目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制.方法 分离培养成年大鼠MSC和乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞进行缺氧处理后,加入MSC或其条件培养液继续在无氧(95%N2+5%CO2,持续缺氧组)或正常氧(缺氧/复氧组)条件下共培养72 h,采用Hoechst细胞核染色,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果 持续
【机 构】
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100083,北京大学第三医院心内科,分子心血管学教育部重点实验室,100083,北京大学第三医院心内科,分子心血管学教育部重点实验室,北京大学分子医学研究所,100083,北京大学第三医院心内科,分
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目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)对缺氧诱导心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制.方法 分离培养成年大鼠MSC和乳鼠心肌细胞,将培养的乳鼠心肌细胞进行缺氧处理后,加入MSC或其条件培养液继续在无氧(95%N2+5%CO2,持续缺氧组)或正常氧(缺氧/复氧组)条件下共培养72 h,采用Hoechst细胞核染色,计算凋亡细胞百分率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果 持续缺氧可以诱导心肌细胞凋亡,凋亡率为51.6%±2.4%,与MSC或其条件培养液共培养,心肌细胞凋亡率显著减低,分别为15.1%±5.4%和24.0%±4.2%(均P<0.01);缺氧/复氧损伤可以引起心肌细胞凋亡,凋亡率为20.9%±2.7%,心肌细胞与MSC共培养,凋亡率显著减低(11.5%±3.7%,P<0.05);心肌细胞与MSC条件培养液共培养,凋亡率略有减低(20.1%±4.2%,P>0.05).蛋白质免疫印迹显示凋亡时心肌表达Bax水平较高,与MSC或其条件培养液共培养时,Bax表达水平呈不同程度降低,与心肌细胞凋亡发生率减低一致,Bcl-2无明显变化.结论 MSC对体外缺氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是通过细胞间直接接触和旁分泌细胞因子,影响了Bcl-2家族部分蛋白分子在心肌细胞的表达。
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