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目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)对人巨核细胞及其前体细胞的抑制作用及其机制,并观察HCMV反义寡核苷酸(ASON)的抗病毒感染作用. 方法在半固体培养基上定向诱导CD34+细胞向巨核细胞分化.用HCMV AD169病毒株感染培养的巨核细胞和经ASON预处理的CD34+细胞,观察CFU-MK形成率的变化,分别用PCR、RT-PCR法检测CFU-MK细胞中HCMV即刻早期蛋白(IEP)基因DNA和mRNA、即刻早期基因(UL36) mRNA表达.用MTT法测定ASON的细胞毒性. 结果 CD34+细胞在半固体培养基中定向分化为巨核祖细胞.HCMV AD169株能明显抑制巨核细胞的体外增殖,与灭活病毒组比较,三个不同病毒滴度感染组的CFU-MK分别减少了21.6%、33.8%、46.3%,显示抑制程度与病毒感染滴度呈剂量依赖关系;HCMV感染的CFU-MK细胞中可检出HCMV IEP基因DNA、IEP基因mRNA和UL36 mRNA.0.08 μmol/L的UL36 ASON (UL36Anti)能使HCMV感染细胞CFU-MK形成率恢复正常,与10 000 TCID50 HCMV感染组比较(分别为58.24±7.42和 31.17±4.45),差异有显著性(P<0.05), RT-PCR未能检出UL36 mRNA.而改变UL36Anti中1个碱基的ASON(MM1),浓度只有达到0.40 μmol/L才能对抗HCMV的作用.MTT结果表明UL36Anti显著影响细胞生长的浓度为90.00 μmol/L.结论 HCMV在体外能直接感染巨核细胞及其前体细胞,并抑制其增殖,提示HCMV感染引起的血小板减少与巨核细胞受HCMV抑制有关.特异的ASON有一定的抗HCMV活性。