评价组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)与瑞芬太尼后处理对糖尿病性心肌细胞保护作用削弱机制的关系。
方法H9c2细胞在10%胎牛血清DMEM/F12培养基中培养、传代，接种于6孔板(2 ml/孔)，接种密度105个/ml，接种12 h后细胞贴壁，换正常糖(5.5 mmol/L)或高糖(25 mmol/L)DMEM培养基培养48 h。采用随机数字表法分为6组(n＝18)：对照组(CON组)、缺氧复氧组(H/R组)、瑞芬太尼后处理组(RPC组)、高糖组(HG组)、高糖＋缺氧复氧组(HG-H/R组)和高糖＋瑞芬太尼后处理组(HG-RPC组)。H/R组、RPC组、HG-H/R组和HG-RPC组弃去培养液，加入Tyrode液，将培养板置于95%N2-5%CO2培养罐中孵育5 h，H/R组和HG-H/R组更换为含10%胎牛血清的相应糖DMEM培养基孵育1 h，RPC组和HG-RPC组更换为含终浓度为1 μmol/L瑞芬太尼的DMEM培养基孵育1 h。于复氧1 h时，采用CCK-8法检测细胞活力，AnnexinV-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测细胞HDAC3和caspase-3表达水平。
结果与CON组比较，H/R组细胞活力降低，细胞凋亡率增加，caspase-3与HDAC3表达上调(P<0.05)；与H/R组比较，RPC组细胞活力升高，细胞凋亡率下降，caspase-3和HDAC3表达下调(P<0.05)；与HG组比较，HG-H/R组细胞活力降低，细胞凋亡率升高，caspase-3和HDAC3表达上调(P<0.05)；与HG-H/R组比较，HG-RPC组细胞活力、细胞凋亡率、caspase-3与HDAC3表达差异无统计学意义(P>0.05)。
结论瑞芬太尼后处理对糖尿病性心肌细胞保护作用削弱的机制与高糖上调HDAC3表达有关。