米曲霉碱性蛋白酶基因的前导区对其在毕赤酵母中表达的必要性

来源 :上海交通大学学报(农业科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackli2
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为探讨前导区对米曲霉碱性蛋白酶基因在毕赤酵母中表达的必要性,本试验首先将米曲霉碱性蛋白酶的成熟肽编码基因(alp-m)和表达载体pPIC9K双酶切后连接,得到重组表达载体pPIC9K/a/p-m。然后将其线性化后电转化毕赤酵母GS115,筛选阳性转化子进行甲醇诱导表达,并进行SDS-PAGE分析和碱性蛋白酶活力测定,同时在转录水平上对目的基因进行了Northem blot检测。将得到的结果与以前研究中得到的带有前导区的米曲霉碱性蛋白酶成熟肽基因在毕赤酵母中的表达结果进行对比。结果表明:如果没有前导区,米曲
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