转雪花莲外源凝集素基因烟草对桃蚜的抑制作用

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将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的cDNAGNA12和其前体蛋白cDNAGNA34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaMV35S启动子或二元载体pBcop1的CoYMV启动子下游,分别构建成植物表达载体pBGna12、pBGna34、pBCGna12和pBCGna34。土壤农杆菌介导的转化再生植株的PCR和Southernblot分析表明,GNA基因已整合到烟草DNA中。Westernblot分析发现pBGna34和pBCGna34的转基因植株能有效地表达外源GNA,表达量约占可溶性总蛋白的008%~015%,并且前体蛋白基因编码的蛋白在植物体内进行了正确的加工;而pBGna12和pBCGna12的植株几乎检测不到外源GNA的表达。有效表达外源GNA的pBGna34和pBCGna34的转基因植株具有较强的抗蚜活性,平均能够抑制桃蚜(Myzuspersicae)45%~60%蚜口密度,有的高达90%以上。在转基因烟草中含双倍增强子的CaMV35S启动子与韧皮部特异表达的CoYMV启动子介导GNA基因表达具有相似的强度,但它们的抗蚜活性存在差异。
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