精囊蛋白Semenogelin抑制精子活动的活性片段分析

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目的:制备重组Semenogelin(Sg)及其不同的氨基酸片段,研究其对精子活动的影响。方法:设计特异性的引物,用分子克隆技术从精囊cDNA文库中扩增精囊蛋白Sg及其N端和C端片段的DNA,再将DNA插入质粒载体PET100,筛选序列正确的阳性克隆,转染B121(DE3)大肠埃希菌,诱导表达重组人类Sg蛋白及其N端和C端片段,用50%Ni-NTA纯化重组蛋白,用上游法筛选出的正常生育男性活动精子行抑制分析,研究重组Sg及其两片段在4种不同浓度(0、1、5、10)ng/μl下对精子活动的影响。结果:重组S
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