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以牛瘤胃内容物为菌源，在高浓度CO2下向培养基额外添加莫能菌素和富马酸钠实现选择性富集培养。溴甲酚绿中性平板变色圈作为筛选标记，以变色区域大小初步筛选得到500株产酸菌株。结合TLC法快速地确定了其中含有28株产琥珀酸菌株。在HPLC和HPCE对发酵液检测的对比过程中优选HPCE法，检测发酵液得到6株优良菌株，其中发现15号菌株琥珀酸产量达11．5g／L，有较少的甲酸和乙酸产生。验证试验表明：该方法对牛瘤胃中的琥珀酸产生菌可以实现快速、有效的分离筛选，具有很好的重现性.