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奶牛胚胎移植技术是目前奶牛繁育领域中先进的生物技术,是生产优质高产奶牛和提高母犊出生比例的有效途径。2008年12月,个旧市畜牧技术推广站与云南中科胚胎工程生物技术有限公司合作,在乍甸乳业奶牛场和市畜牧技术推广站肉牛养殖场进行了荷斯坦奶牛性别控制胚胎移植试验,移植妊娠率为32.6%,产犊率为73.3%,性别控制准确率达90.9%,收到了一定的效果。
一、试验地点
云南省个旧市乍甸乳业奶牛场、市畜牧技术推广站肉牛养殖场。
二、试验材料
1. 受体母牛的选择。①品种:荷斯坦奶牛、黄牛。②年龄:18~20月龄青年牛和1~4胎的经产母牛。③体重:青年牛体重为成年牛体重的75%。④无产科疾病:直肠检查母牛生殖系统(卵巢、卵泡、子宫)发育正常,无生殖道疾病,无流产史,发情正常,无传染性疾病。⑤营养状况良好:选择健康、体型较大、性情温驯、膘情适中的母牛,营养状况中等以上。
2. 药品和器械。前列腺素、2%普鲁卡因注射液、70%酒精棉球、胚胎移植枪、无菌外套、卫生纸。
3. 冷冻性控胚胎。云南中科胚胎工程生物技术有限公司提供。
三、试验方法
1. 对受体牛催情。按照受体选择标准,共选择受体牛85头。受体牛同期发情处理,采用2次注射前列腺素的方法,即在受体牛发情周期的任意一天注射前列腺素4毫升,间隔11天后第二次注射前列腺素5毫升,36~72小时后进行发情观察,每天早晨、中午、下午各观察1次,每次1小时,并做好详实的记录。
2. 对受体牛的黄体及子宫同步检查。第二次注射前列腺素后,根据受体牛发情情况,在发情后的第七天,直肠检查受体牛子宫、黄体大小、质地、性状等,未排卵及新生黄体或黄体界限不明显的受体牛予以淘汰,不进行移植。经检查确定黄体合格的受体牛先用2%普鲁卡因注射液尾椎硬膜外麻醉,消毒、清洗擦拭外阴后进行移植。
3. 冷冻胚胎的操作程序。胚胎操作室要求干净、无灰尘、无异味。在移植前进行紫外线消毒,所有器械、用品需经严格消毒处理且摆放井然有序,便于使用。工作人员的手臂在操作前要用酒精棉消毒。本实验所采用的胚胎冷冻保护剂为甘油,多步脱甘油解冻处理后进行移植,移植程序为:胚胎解冻→胚胎质量鉴定→合格胚胎装管→移植。
4. 胚胎移植。将解冻装管的胚胎在较短的时间内(原则上不超过10分钟)植入受体牛体内,同时要注意两手的协调性,避免在移植的过程中擦破子宫内膜。移植部位是黄体发育较好一侧子宫角的上二分之一至下三分之一,如有可能则越深越好。
5. 移植后受体牛的饲养管理。受体牛要栓系圈养,保持环境安静,避免应激。每天补饲精料2.5千克,精料要营养丰富、品质优良,同时,供给优质牧草,注意补充维生素A、D、E和微量元素及矿物质,每天饲喂青贮饲料25千克以上,禁止饲喂霉变饲料。
四、结果
对85头受体牛进一步筛选,共选出适宜胚胎移植的母牛46头,经过二次同期发情处理,3个月后进行直肠妊娠检查,确定移植妊娠的15头,移植平均妊娠率为32.6%。产犊11头,其中母犊10头、公犊1头,产犊率73.3%,性别控制准确率达90.9%。
五、讨论
1. 与受胎率相关的主要因素。此次选择的母牛发情正常,营养状况良好,经产牛年龄为1.5~6岁,无产科疾病,但受胎率仍较低,主要原因有2方面:一是初次进行胚胎移植,缺乏实践经验,技术员水平较低。二是胚胎质量。胚胎质量也是决定移植成功与否的重要因素之一,只有好的胚胎才能获得较高的受胎率。选择A级胚胎可保证获得较高的受胎率,但此次移植的胚胎全部是B级,所以移植试验的受胎率相对较低。
2. 发情症状与受胎率的关系。受体牛的两次发情症状明显,外阴肿胀明显,黏液量多,清亮干净的受胎率较高。
3.黄体发育与受胎率的关系。通过对受体牛进行直检,黄体发育直径在0.6~1.5厘米之间,凸出卵巢表面,有弹性、柔软的受胎率高。
4. 受体牛的年龄跟受胎有关。此次移植选择的受体牛為1~4胎的经产牛,受胎牛15头,其中青年牛6头,占40%,青年牛相对经产牛受胎率较高。
5. 受体牛的饲养管理。对牛群进行精心饲养管理,日粮精粗搭配,在胚胎移植前6~8周开始加强营养供给,在同期发情处理前1周开始饲喂精料,每天2.5千克,直到胚胎移植时。苜蓿、黑麦草自由采食,粗料以青贮玉米秸为主。保持牛体况良好,膘情中等。受体牛自由运动。
(作者联系地址:许娅虹 马云章 李宁仙 云南省个旧市畜牧技术推广站 邮编:661110;王建云 龙梅 云南省红河州动物卫生监督所 邮编:661110)
一、试验地点
云南省个旧市乍甸乳业奶牛场、市畜牧技术推广站肉牛养殖场。
二、试验材料
1. 受体母牛的选择。①品种:荷斯坦奶牛、黄牛。②年龄:18~20月龄青年牛和1~4胎的经产母牛。③体重:青年牛体重为成年牛体重的75%。④无产科疾病:直肠检查母牛生殖系统(卵巢、卵泡、子宫)发育正常,无生殖道疾病,无流产史,发情正常,无传染性疾病。⑤营养状况良好:选择健康、体型较大、性情温驯、膘情适中的母牛,营养状况中等以上。
2. 药品和器械。前列腺素、2%普鲁卡因注射液、70%酒精棉球、胚胎移植枪、无菌外套、卫生纸。
3. 冷冻性控胚胎。云南中科胚胎工程生物技术有限公司提供。
三、试验方法
1. 对受体牛催情。按照受体选择标准,共选择受体牛85头。受体牛同期发情处理,采用2次注射前列腺素的方法,即在受体牛发情周期的任意一天注射前列腺素4毫升,间隔11天后第二次注射前列腺素5毫升,36~72小时后进行发情观察,每天早晨、中午、下午各观察1次,每次1小时,并做好详实的记录。
2. 对受体牛的黄体及子宫同步检查。第二次注射前列腺素后,根据受体牛发情情况,在发情后的第七天,直肠检查受体牛子宫、黄体大小、质地、性状等,未排卵及新生黄体或黄体界限不明显的受体牛予以淘汰,不进行移植。经检查确定黄体合格的受体牛先用2%普鲁卡因注射液尾椎硬膜外麻醉,消毒、清洗擦拭外阴后进行移植。
3. 冷冻胚胎的操作程序。胚胎操作室要求干净、无灰尘、无异味。在移植前进行紫外线消毒,所有器械、用品需经严格消毒处理且摆放井然有序,便于使用。工作人员的手臂在操作前要用酒精棉消毒。本实验所采用的胚胎冷冻保护剂为甘油,多步脱甘油解冻处理后进行移植,移植程序为:胚胎解冻→胚胎质量鉴定→合格胚胎装管→移植。
4. 胚胎移植。将解冻装管的胚胎在较短的时间内(原则上不超过10分钟)植入受体牛体内,同时要注意两手的协调性,避免在移植的过程中擦破子宫内膜。移植部位是黄体发育较好一侧子宫角的上二分之一至下三分之一,如有可能则越深越好。
5. 移植后受体牛的饲养管理。受体牛要栓系圈养,保持环境安静,避免应激。每天补饲精料2.5千克,精料要营养丰富、品质优良,同时,供给优质牧草,注意补充维生素A、D、E和微量元素及矿物质,每天饲喂青贮饲料25千克以上,禁止饲喂霉变饲料。
四、结果
对85头受体牛进一步筛选,共选出适宜胚胎移植的母牛46头,经过二次同期发情处理,3个月后进行直肠妊娠检查,确定移植妊娠的15头,移植平均妊娠率为32.6%。产犊11头,其中母犊10头、公犊1头,产犊率73.3%,性别控制准确率达90.9%。
五、讨论
1. 与受胎率相关的主要因素。此次选择的母牛发情正常,营养状况良好,经产牛年龄为1.5~6岁,无产科疾病,但受胎率仍较低,主要原因有2方面:一是初次进行胚胎移植,缺乏实践经验,技术员水平较低。二是胚胎质量。胚胎质量也是决定移植成功与否的重要因素之一,只有好的胚胎才能获得较高的受胎率。选择A级胚胎可保证获得较高的受胎率,但此次移植的胚胎全部是B级,所以移植试验的受胎率相对较低。
2. 发情症状与受胎率的关系。受体牛的两次发情症状明显,外阴肿胀明显,黏液量多,清亮干净的受胎率较高。
3.黄体发育与受胎率的关系。通过对受体牛进行直检,黄体发育直径在0.6~1.5厘米之间,凸出卵巢表面,有弹性、柔软的受胎率高。
4. 受体牛的年龄跟受胎有关。此次移植选择的受体牛為1~4胎的经产牛,受胎牛15头,其中青年牛6头,占40%,青年牛相对经产牛受胎率较高。
5. 受体牛的饲养管理。对牛群进行精心饲养管理,日粮精粗搭配,在胚胎移植前6~8周开始加强营养供给,在同期发情处理前1周开始饲喂精料,每天2.5千克,直到胚胎移植时。苜蓿、黑麦草自由采食,粗料以青贮玉米秸为主。保持牛体况良好,膘情中等。受体牛自由运动。
(作者联系地址:许娅虹 马云章 李宁仙 云南省个旧市畜牧技术推广站 邮编:661110;王建云 龙梅 云南省红河州动物卫生监督所 邮编:661110)