重组猪IFNα的构建及原核可溶性表达研究

来源 :重庆理工大学学报:自然科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alanyu97
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使用原核表达系统可溶性表达猪α-干扰素,并进行纯化和鉴定。根据GeneBank中报道的猪仅一干扰素成熟肽基因序列设计引物,以猪肝脏细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增猪α-干扰素成熟肽基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET32a+中,转化大肠杆菌DH5a。阳性克隆经PCR鉴定、双酶切鉴定以及测序鉴定后,转入大肠杆菌B121进行诱导表达。对表达产物进行SDS.PAGE分析、镍柱亲和层析纯化、Western-blot鉴定。结果表明:成功构建了猪仪一干扰素原核表达载体pET32a+-poIFN-α;表达产
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