沙门菌PCR快速检测试剂盒的研制与应用

来源 :中国兽医科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:carjitar
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为建立一种简单、快速、灵敏、准确的沙门菌检测方法,根据沙门菌fimY保守基因序列设计合成了1对引物,建立了快速检测沙门菌的PCR方法,并对反应条件进行优化,组装成快速检测试剂盒。结果显示,所有沙门菌均扩增出526bp的特异性条带,而非沙门菌均未扩增出任何条带。检测灵敏度达93CFU,还可检出含3CFU的样品用BP预增菌的菌液或用MM增菌后的菌液,而且稳定性良好,冷冻至少能保存12个月。采用直接菌体加入法、热裂解法、反复冻融法、CTAB碱裂解法和柱式试剂盒提取法分别提取核酸模板,结果CTAB法效果最好,但操
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