【摘 要】
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利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核衣壳蛋白N基因,将其克隆入杆状病毒供体质粒pFastBacTMDual,pFastBacTMDual-N转入DH10Bac菌中进行同源重组,经三重抗性和蓝白
【机 构】
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西南大学(荣昌校区)动物医学系; 新疆农业大学动物医学学院;
【基金项目】
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新疆维吾尔族自治区教育厅科研计划项目资助(20120984);中央高校基本科研业务基金重点项目资助(XDJK2014B039)
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利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核衣壳蛋白N基因,将其克隆入杆状病毒供体质粒pFastBacTMDual,pFastBacTMDual-N转入DH10Bac菌中进行同源重组,经三重抗性和蓝白斑筛选,得到重组质粒Bacmid-N,将其转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-N.通过间接免疫荧光试验检测显示,重组蛋白在昆虫细胞中得到表达.体外组装TGEV病毒样颗粒(VLPs)试验表明,rBac-N单独感染sf9细胞未见形成明显的病毒样颗粒,昆虫细胞内只观察到杆状病毒粒子.试验结果为探讨TGEV核衣壳蛋白在病毒装配过程中的作用提供了依据.
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