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[目的]为动物细胞核移植、转基因操作等提供充足的供体材料。[方法]通过对兔皮肤成纤维细胞的体外原代、传代培养和冷冻复苏, 检测支原体污染状况。[结果]结果表明： 在含有15 % FCS（Fetal Calf Serum） 的DMEM 中培养的细胞初期生长状态较10 %FCS 中的细胞长势好, 后期则相反。用PCR 法对培养至25 代的兔皮肤成纤维细胞进行支原体检测, 均没有发现支原体污染现象。[结论]PCR 法检测细胞培养支原体污染具有灵敏、准确、简便、快速、特异性好的优点。