【摘 要】
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目的 探讨应用口腔黏膜拭子提取基因组DNA进行渗出性年龄相关性黄斑变性(AMD)易感基因检测的可行性.方法 对照研究.选择已确诊的65例渗出性AMD患者.应用口腔拭子刮取患者不同
【机 构】
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同济大学附属同济医院眼科,首都医科大学附属北京同仁医院 北京同仁眼科中心 北京市眼科学与视觉科学重点实验室
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目的 探讨应用口腔黏膜拭子提取基因组DNA进行渗出性年龄相关性黄斑变性(AMD)易感基因检测的可行性.方法 对照研究.选择已确诊的65例渗出性AMD患者.应用口腔拭子刮取患者不同部位(单侧颊黏膜与上下齿龈沟)的口腔黏膜,提取基因组DNA,应用分光光度计测定基因组DNA含量.抽取患者静脉血,应用PCR和限制性酶切分析法,对CFH、LOC387715及HTRA1位点进行基因型分析,比较口腔黏膜拭子取材与血液样本取材所获基因分型结果的一致性.口腔黏膜两种取材法提取的基因组DNA含量比较,采用Student t检验.结果 每位受试者分别获得3个口腔黏膜拭子,其中2个拭子分别从患者单侧颊黏膜取材,另1个拭子从患者上下齿龈沟处取材.于取材1周内检测基因组DNA含量.单侧颊黏膜取材患者基因组DNA含量为(3.17±1.46) μg,上下齿龈沟取材患者基因组DNA含量为(3.94±1.04) μg,口腔黏膜两种取材法间获取的基因组DNA含量差异有统计学意义(t=6.79,P＜0.05).单侧颊黏膜拭子干燥保存(- 20℃)12个月后检测基因组DNA含量为(3.10±1.17) μg,与取材1周内的单颊黏膜拭子检测结果比较,差异无统计学意义(t =0.59,P＞0.05).应用口腔黏膜拭子与血液样本提取的基因组DNA分型结果完全一致.结论 口腔黏膜拭子是一种简单、无创、可靠的获取基因组DNA的方法,可部分替代静脉血进行AMD的易感基因分析.口腔黏膜拭子干燥保存(- 20℃)12个月后基因组DNA含量未减少.
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