【摘 要】
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为了解牛卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外成熟过程中Ghrelin对卵丘细胞增殖的可能调节及其与促卵泡素(Follicle-stimulating hormone,FSH)在卵丘细胞增殖过程中可能的调控关系
【基金项目】
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国家自然科学基金(30860201);内蒙古自然科学基金(2012MS0411;2010BS0508)
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为了解牛卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外成熟过程中Ghrelin对卵丘细胞增殖的可能调节及其与促卵泡素(Follicle-stimulating hormone,FSH)在卵丘细胞增殖过程中可能的调控关系,本研究运用实时定量RT-PCR技术首先检测了体外不同成熟时间(0、8、16和24h)牛卵丘细胞中Ghrelin mRNA的相对表达差异,然后在体外成熟8h,探讨了FSH与FSH受体结合抑制剂(FSH binding inhibitor,FSHBI)对Ghrelin mRNA表达的影响,以及FSH与Ghrelin受体抑制剂([D-Lys3]-GHRP-6)对增殖相关基因PCNA,BCL-2和BAX mRNA表达可能的调节作用;最后利用细胞增殖活性测定技术检测了FSH与[D-Lys3]-GHRP-6对卵丘细胞增殖活性的影响。结果显示:(1)Ghrelin mRNA相对水平在体外成熟8h卵丘细胞中最高,显著高于0和24h组(P<0.05);(2)0.01IU·mL-1FSH添加组与对照组相比,Ghrelin mRNA表达显著升高(P<0.05);在添加400ng·mL-1 FSHBI后,GhrelinmRNA表达下降且差异显著(P<0.05);(3)添加FSH后,PCNA和BCL-2mRNA表达以及卵丘细胞增殖活性显著升高(P<0.05);添加[D-Lys3]-GHRP-6后,上述基因表达水平与增殖活性显著降低(P<0.05)。上述结果表明,Ghrelin参与FSH对体外成熟过程卵丘细胞增殖的调节,本研究结果有助于进一步了解FSH调控卵泡发育的机制。
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