转录因子Kaiso真核表达载体的构建及鉴定

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hnxmyuandong

【摘要】

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目的构建并鉴定转录因子Kaiso的表达质粒pEGFP-Kaiso。方法采用PCR的方法扩增pCS2-Kaiso中人Kaiso的全长序列,克隆至载体pEGFP-N1中,构建重组质粒pEGFP-Kaiso,以酶切及基因测

【作者】

：

曹红一唐娜林旭勇张迪苗原王恩华戴顺东

【机构】

：

中国医科大学基础医学院病理学教研室

【出处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2012年2期

【关键词】

：

Kaiso 基因克隆真核表达载体 Kaiso gene cloning eukaryotic expression vector

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目的构建并鉴定转录因子Kaiso的表达质粒pEGFP-Kaiso。方法采用PCR的方法扩增pCS2-Kaiso中人Kaiso的全长序列,克隆至载体pEGFP-N1中,构建重组质粒pEGFP-Kaiso,以酶切及基因测序方法鉴定重组质粒的准确性。利用LipofectamineTM2000将重组质粒转染至肺癌细胞系A549,24 h后荧光显微镜观察绿色荧光信号,48 h后Western blot鉴定Kaiso蛋白表达变化。结果限制性双酶切及DNA测序分析结果显示插入的DNA片段长度约为2 022 bp,与预期

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