【摘 要】
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目的探索采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂检测新鲜脐带不同大小与数量组织中细胞活性,选用合适的组织块大小与数量诱导培养间充质干细胞,以获得最佳的细胞数量与细胞活性
【机 构】
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安徽省血液中心/合肥市中心血站输血研究室,中国人民解放军第105医院妇产科,加拿大宝济脐血库,
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目的探索采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂检测新鲜脐带不同大小与数量组织中细胞活性,选用合适的组织块大小与数量诱导培养间充质干细胞,以获得最佳的细胞数量与细胞活性。方法临床获取新鲜脐带加工处理剪切成1/8组织块大小,重量为(0.045±0.001)g,采用CCK-8检测试剂盒检测新鲜脐带组织块活性,对CCK-8试剂的剂量、加入试剂后孵育时间、脐带组织块剪切大小与数量等做了比较与分析,并在6孔板中加入3块不同脐带组织块大小(1/2组、1/4组、1/8组)诱导培养间充质干细胞,对3组生成的细胞数量和细胞活性做了实验研究。结果新鲜脐带组织块剪切成厚度为0.5 cm左右环形组织块的1/8组织块大小,重量为(0.045±0.001)g,24孔板内脐带组织放置3块,CCK-8试剂浓度为15%,于37℃下孵育7-8 h为检测新鲜脐带组织块活性的最佳检测条件;6孔板中加入3块不同脐带组织块大小(1/2组、1/4组、1/8组)诱导培养间充质干细胞,3组中培养生成的细胞活性无明显差异(P>0.05)。但3组中培养生成的细胞数量,其中1/8组与1/2组或1/4组相比,差异有统计学意义(P<0.01),且每克组织块生成的细胞数量最多。结论 CCK-8试剂盒可用于准确地评估新鲜脐带组织中细胞活性。
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