【摘 要】
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目的通过巢式聚合酶链式反应和菌落聚合酶链式反应检测艾滋病患者感染HIV-1病毒的gag、env和pol基因变异情况,为艾滋病的临床治疗提供参考。方法采集HIV-1艾滋病患者全血标本
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院传染病科,广西壮族自治区疾病预防控制中心,广西玉林市红十字会医院检验科,
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目的通过巢式聚合酶链式反应和菌落聚合酶链式反应检测艾滋病患者感染HIV-1病毒的gag、env和pol基因变异情况,为艾滋病的临床治疗提供参考。方法采集HIV-1艾滋病患者全血标本,提取HIV-1cDNA,进行巢式PCR和菌落PCR,并测序。结果巢式PCR检测70份全血标本HIV-1病毒gag、env、pol基因,分别有50、44和59份阳性,电泳检测3种基因巢式PCR产物分别为650、650和1 100bp。挑取阳性克隆体进行菌落PCR,扩增产物大小分别为750、750和1 200bp。分析3种基因序列,有两份标本gag基因在其片段尾部第118和119位间插入一个氨基酸;env基因的V3环顶端存在6种四肽序列变异方式,即GPGR、GPGQ、GQGR、GPGA、GLGR、GPGK;pol基因在PR区的第40位发生了氨基酸突变,即由TGG变异为TAG,在其第52位同样也发生了突变,由GGT变异为AGT,而在RT区第153位发生了无义突变,即突变为终止密码子。结论本地区艾滋病患者感染HIV-1病毒的gag、env和pol基因均发生了不同程度的突变,可供治疗时参考。
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