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目的：建立了HSA荧光猝灭法测定Cu（Ⅱ）的分析新方法。方法：在均匀设计优化的反应条件下，研究了Cu（Ⅱ）对HSA的荧光猝灭效应。结果：在pH=8．0的KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液中，一定量的Cu（Ⅱ）对HSA荧光的猝灭有良好的线性关系。检出限为19．7ng／ml；相对标准偏差0．9％-1．3％；样品加标回收率93．0％～102．7％；线性范围0．07～6．00μg／ml。结论：方法与单因素轮换法实验结果比较，实验条件更优化，方法更简便、灵敏。可直接用于环境水样中Cu（Ⅱ）的测定。