【摘 要】
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目的 探讨靶向β-catenin的shRNA对结肠癌细胞Colo205的WNT通路的阻断和该基因沉默效应对结肠癌细胞在体外的生长抑制作用.方法 构建靶向β-catenin的shRNA载体质粒和阴性对照载体,然后分别转染入结肠癌细胞Colo205.用RT-PCR和Western印迹法检测β-catenin的mRNA和蛋白的表达情况,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin蛋白的表达.噻唑蓝实验评价转
【机 构】
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510080,广州,中山大学附属第一医院外科,中山大学附属第六医院,胃肠肛门医院,结直肠外科,510080,广州,中山大学附属第一医院外科,510080,广州,中山大学附属第一医院外科,中山大学附属第
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目的 探讨靶向β-catenin的shRNA对结肠癌细胞Colo205的WNT通路的阻断和该基因沉默效应对结肠癌细胞在体外的生长抑制作用.方法 构建靶向β-catenin的shRNA载体质粒和阴性对照载体,然后分别转染入结肠癌细胞Colo205.用RT-PCR和Western印迹法检测β-catenin的mRNA和蛋白的表达情况,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin蛋白的表达.噻唑蓝实验评价转染后各组细胞的体外增殖情况.软琼脂集落形成实验检测各组细胞的非锚着依赖性生长的能力.结果 成功构建了靶向β-catenin的shRNA和阴性对照质粒载体.特异性靶向β-catenin的shRNA能够明显下调β-catenin mRNA,并抑制β-catenin蛋白的表达,其抑制率分别为47.89%和45.26%(P<0.05).转染了特异性shRNA的实验组(CAT组)细胞增殖在转染后呈现随时间延长而进行性抑制的现象.在转染后72 h,CAT组的细胞存活率为48.5%,与空白对照组的91.3%相比明显降低(P<0.05).在软琼脂里CAT组的细胞克隆数目(9个)明显少于空白对照组(46个)和阴性对照组(43个)(P<0.05).结论 靶向β-catenin的特异性shRNA对结肠癌Colo205细胞具有沉默β-catenin基因表达从而阻断WNT信号通路的作用,并且能够有效地在体外抑制结肠癌细胞的增殖。
其他文献
目的 探讨腹腔镜在胃肠道异物取出中的应用价值.方法 对2004年12月至2008年8月在上海第二军医大学长海医院微创外科施行腹腔镜胃肠道异物取出术的5例患者的临床资料进行回顾性分析.结果 本组患者腹腔镜探查术中发现胃内毛发2例,回肠内义齿1例,回肠内结石1例,胃内结石1例.均成功取出异物.手术时间60～120 min,术后排气时间2～3 d,住院时间5～8 d.随访4～48个月,术后恢复好,无并发
目的 观察加速康复外科技术在胃癌患者围手术期治疗过程中的应用情况.方法 使用计算机产生随机数字,完全随机将92例胃癌患者分为常规对照组(46例,采用常规围手术期处理方案)和加速康复组(46例,采用加速康复的围手术期处理方案).动态监测比较两组术后第1、3、7天血清白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及C反应蛋白(CRP)水平,同时应用间接能量测定仪测定患者静息能量消耗(REE)和
目的 探讨吻合器痔上黏膜环切钉合术(PPH)术后迟发性大出血的原因和诊治方法.方法 回顾性分析2005年1月至2008年6月问复旦大学附属中山医院的7例PPH术后迟发性大出血患者的临床资料.结果 本组PPH术后迟发性大出血的发生率为1.8%(7/395).其中1例患者行手术8字缝扎止血:另外6例行急诊内镜下止血.其中3例单用高频电凝止血,2例通过高频电凝后于溃疡周围注射硬化剂,1例行高频电凝并用止
随着TME观念的推广、手术技术和相关吻合器械的发展,中低位直肠癌手术保肛率有所提高.但同时,遵循TME原则的经腹直肠癌前切除术后出现吻合口瘘的风险亦有增高趋势[1].2007年3月至2008年12月,南京军区福州总医院普通外科连续185例经腹直肠癌前切除术患者应用大口径肛管引流减压预防吻合口瘘,无1例发生吻合口瘘,效果理想.现总结报告如下。
根据世界卫生组织癌症研究中心2002年的统计,我国胃癌发病率仅次于日本,位于全球第2位.目前,我国胃癌发病率仍居全球第2位,而死于胃癌的人数约占全球该病死亡总人数的1/4.每年新增胃癌患者约40万例,病死人数约30万例~[1].过去30年里,我国胃癌患者手术治疗的5年生存率仍徘徊在20%～30%.西方国家最新资料也显示,可切除胃癌的患者5年生存率为10%～30%~[2].但日本的手术切除胃癌患者5
目的 以黑色素瘤抗原基因(MAGE)-1和MAGE-3 mRNA作为特异性肿瘤标记物,建立用RT-PCR检测胃癌患者外周血中肿瘤细胞的有效方法.方法 采集40例胃癌患者及20名健康志愿者的外周血,用RT-PCR方法检测其外周血单核细胞(PBMC)中MAGE-1和MAGE-3mRNA表达.同时用RT-PCR方法检测胃癌患者肿瘤组织中上述MAGE-1和MAGE-3的表达.结果 40例胃癌患者中,分别有
我院2003年1月至2005年1月,应用吻合器痔上黏膜环切钉合术(procedure for prolapse and hemorrhoids,PPH)加中药芍倍注射治疗重度痔30例,取得满意疗效。
目的 探讨脾酪氨酸激酶(Syk)基因甲基化、表达水平与结直肠癌患者临床病理特征及预后之间的关系.方法 收集2001年1～12月间经手术治疗的120例结直肠癌标本,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析Syk基凶的甲基化状态和表达情况.并分析Syk基因甲基化失表达与结直肠癌临床病理特征和生存预后之间的关系.结果 (1)120例结直肠癌患者中,48例肿瘤组织未
患者男性,25岁.因进食后呕吐1月余于2008年7月21日入院.患者有强直性脊柱炎病史6年,且并发双侧股骨头坏死.查体:一般状态差,腹部凹陷,未见胃肠型及蠕动波,柔软,全腹无压痛及反跳痛,肠鸣音正常.辅助检查:血常规:WBC:14.2×109,HB:149 g/L,肝功能:白蛋白27 g/L,肾功能正常,CEA、CA199正常,红细胞沉降率113 mm/h,C反应蛋白增高,人类白细胞抗原B27阳性