【摘 要】
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目的:观察脾虚大鼠骨骼肌线粒体自噬相关蛋白表达的变化,以期阐释针刺足三里治疗脾虚证的部分作用机制。方法:40只雄性SD大鼠,适应性饲养后随机分为正常对照组、脾虚组、足三
【机 构】
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辽宁中医药大学; 辽宁省肿瘤医院; 广东省佛山市顺德区伍仲珮纪念医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目:81603704;辽宁省教育厅一般项目:L 201708
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目的:观察脾虚大鼠骨骼肌线粒体自噬相关蛋白表达的变化,以期阐释针刺足三里治疗脾虚证的部分作用机制。方法:40只雄性SD大鼠,适应性饲养后随机分为正常对照组、脾虚组、足三里组、非经非穴组,每组10只。除正常对照组外,其余3组采用三因素复合法复制脾虚证模型,造模持续14 d。足三里组电针大鼠双侧"足三里"穴,非经非穴组电针双侧髂嵴上非经非穴点,疏密波,频率2 Hz/100 Hz,每日1次,每次20 min,干预10 d。正常对照组和脾虚组大鼠在每天同一时间固定20 min,不予电针干预。采用高效液相色谱法检测大鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)、磷酸腺苷(AMP)的含量;Western blotting法检测大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、Atg1/失调51样激酶-1(ULK1)、磷酸化ULK1(p-ULK1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)以及LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果:脾虚组大鼠骨骼肌ATP含量明显低于正常对照组(P<0.01),足三里组ATP含量高于脾虚组(P<0.05)但低于正常对照组(P<0.05),非经非穴组与脾虚组差异无统计学意义(P>0.05);脾虚组、足三里组AMP/ATP较正常对照组上调(P<0.01,P<0.05);脾虚组p-AMPK/AMPK较正常对照组差异无统计学意义(P>0.05),足三里组p-AMPK/AMPK较正常对照组和脾虚组均上调(均P<0.05);足三里组p-ULK1/ULK1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均明显高于正常对照组和脾虚组(均P<0.01)。结论:电针"足三里"可能是通过激活AMPK,AMPK直接磷酸化ULK1,形成稳定的ULK1/AMPK复合物,提高线粒体自噬能力,从而起到调理脾胃、补中益气治疗脾虚证的作用。
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