毛刺槐的组织培养和植株再生

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1 植物名称毛刺槐(Robinia hispida),别名毛洋槐、江南槐。2 材料类别带腋芽的茎段。取自本校校园里的10~20年生毛刺槐的当年生新梢。3 培养条件培养基:(1)MS+6.BA 2.0mg·L-1(单位下同)+NAA 0.05;(2)MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(3)MS+6-BA 1.0+NAA 0.05;(4)MS+6-BA 1.0+NAA 0.1;(5)MS+6-BA 0.5+NAA 0.1;(6)MS+6-BA 0.5+NAA 0.05;(7)MS。以上培养基均附加蔗糖30 g·L~、琼脂7 g·L-1,pH6.0~6.5;白天培养室温度为25~30℃,夜间为15~20℃;光照12 h·d-1,光照度2 000~2 500 lx。4 生长与分化情况4.1 芽的诱导 5月初选取生长健壮、无病虫害的母株,切取当年约2~3 cm的新萌发的春梢,去掉叶片和叶柄,用试管刷蘸少许洗衣粉在流水中冲刷干净后,在超净工作台上用70%的酒精消毒20~30 s,再用0.1%升汞加吐温浸泡5~7 min,无菌水冲洗3~5遍,接种到(1)~(6)号培养基上。在培养基(1)和(2)上,接种1周后膨大,萌动。接着新梢生长迅速,外植体基部产生大量的黄绿色愈伤组织。2周后新萌出的嫩芽形成玻璃化,在培养基(3)和(4)上,部分萌出的新芽呈现玻璃化,但没有在培养基(1)和(2)上严重,在培养基(5)和(6)上芽的萌动速度明显减慢,4周后苗平均长到1.7 cm,外植体基部rn产生愈伤组织,所萌出的新生苗正常,未出现玻璃化现象。4.2 试管苗的增殖将萌出的新生芽从茎段中切下,转接到由6-BA和NAA不同浓度组成的培养基上。在培养基(1)、(2)上诱导出的丛生芽数目多,分化快。但玻璃化现象十分严重,加上7~8月份培养室温度较高,更加加重了玻璃化,已分化出的苗全部死亡。在培养基(3)和(4)中,诱导出大量愈伤组织,靠近培养基基部的愈伤组织部分呈现出玻璃苗。同时,新生苗高生长迅速,每3周可继代1次,增殖倍数可达3~5倍,部分苗有玻璃化现象。在培养基(5)和(6)上每4周可继代1次,增殖倍数2~3倍,苗分化正常,未出现玻璃化现象。4.3 根的诱导切取分化的长约2~4 cm健壮新梢转入培养基(7)中,约3周后,从愈伤组织中开始生根,50 d后统计结果,生根率可达90%,平均根长8.7 cm,每个外植体平均根数3.4个。可见,在MS培养基上毛刺槐即可生根,且苗生长健壮。选择苗高5 cm以上的生根苗开瓶移栽,只要温度和湿度控制好,移栽成活率可达70%以上。5 意义与进展毛刺槐为落叶灌木,茎、枝、叶柄及花序上均密生红色长刺毛,花粉红色或淡紫色,大而美丽,是西北地区园林中常见的栽培观赏树种。由于种子很少结实,生产
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