【摘 要】
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目的应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)芯片技术观察5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳鼠心肌细胞心脏毒性相关基因表达的调控作用。方法利用差速贴壁法分
【机 构】
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广东省人民医院医学研究中心,广东省医学科学院广东省心血管病研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(项目编号:81202602,81330007,81373486);广东省医学科研基金(项目编号:B2013017)
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目的应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)芯片技术观察5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳鼠心肌细胞心脏毒性相关基因表达的调控作用。方法利用差速贴壁法分离培养乳鼠心肌细胞,分为对照组和5-FU刺激组。提取并纯化细胞RNA,紫外分光光度计检测RNA提取物浓度、变性琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及完整性。选择包含84个已知心脏毒性相关基因的PCR芯片,采用比较阈值(ΔΔCt)法分析两组基因的表达差异。以表达差异(即上调或下调)大于2倍的基因为有意义的差异基因。结果共有48条基因出现差异表达,其中5条基因表达上调,43条基因表达下调。结论利用PCR芯片技术筛选相关基因,为深入阐明5-FU心脏毒性的作用机制提供了新思路。
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