论文部分内容阅读
目的:构建钙调磷酸酶(CAN)融合基因的原核表达载体,并使其获得表达,为研究该蛋白的功能。在病理生理过程中的变化及相关疾病的治疗奠定基础。方法:利用OLIGO 6.0生物学软件设计一对特异性引物,并在引物中引入适当的酶切位点,采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR),扩增出CaN基因,经BamHI和XhoI双酶切后。将其克隆于上游融合了GST标签的pGEX-6P-1表达载体中,选取鉴定为阳性的重组表达载体,转化于受体菌BL21中,并利用1mMIPTG对其进行诱导,收获表达产物进行SDS—PAGE电泳分析和W