【摘 要】
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目的研究内皮细胞中NOTCH受体是否作为转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)/Smad4信号通路下游靶分子而被TGF-β/Smad4直接调节。方法利用实时荧光定量PCR
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目的研究内皮细胞中NOTCH受体是否作为转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)/Smad4信号通路下游靶分子而被TGF-β/Smad4直接调节。方法利用实时荧光定量PCR、Western印迹实验研究TGF-β对notch1、notch4基因表达的调节,利用荧光素酶报告基因实验研究TGF-β对notch1、notch4基因启动子活性的调节,利用染色质免疫共沉淀实验研究notch1、notch4基因启动子与SMAD蛋白之间的相互作用。结果 TGF-β1和骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)的刺激在转录水平上促进notch1和notch4表达。它们还促进SMAD4与notch4基因启动子上SMAD结合位点的结合。在敲低SMAD4或notch4基因启动子SMAD结合位点突变的情况下,notch4的表达失去对TGF-β1和BMP4的反应性。结论脑血管内皮细胞中SMAD4介导的TGF-β/BMP信号直接上调NOTCH受体表达。
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