【摘 要】
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利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载
【机 构】
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华东理工大学药学院、生物反应器工程国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(31225008,31170815,31071260);上海市科委“创新行动计划”基础研究重点项目(NO12JC1402900);上海市曙光人才计划(11SG31);高等学校博士学科点专项科研基金(20100074110010);高等学校基本科研业务费
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利用光诱导基因表达系统,构建光诱导RNAi系统,并对系统转染比例、转录因子的表达量和shRNAmir表达载体的核心启动子进行优化。通过构建不同启动子的光敏转录因子GAVPO表达载体和不同核心启动子的shRNAmir表达载体,分析它们对报告基因的干扰效果的影响。结果表明,GAVPO的表达量对报告基因沉默效果和shRNAmir的背景表达水平至关重要。低表达量的GAVPO能够实现对报告基因的微调控,报告基因的表达量下降到约60%;而高表达量的GAVPO能够高效抑制报告基因表达,报告基因的表达量下降到34%。
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