目的：采用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)技术观察上行性泌尿感染引起的急性肾盂肾炎中细菌在膀胱肾脏的定殖，探讨疾病发生的机制。方法在雌性小鼠建立荧光标记细菌引起的急性肾盂肾炎感染模型，感染后3 h 收取小鼠膀胱，感染后6 h、24 h 和48 h 分别收集小鼠肾脏，采用细菌涂板检测肾组织细菌含量，利用 CLSM 观察荧光标记细菌的分布情况，并通过 CLSM 进一步研究荧光标记细菌对原代培养的肾小管上皮细胞的作用。结果感染早期细菌主要通过黏附膀胱上皮组织进一步入侵肾脏；感染后6 h 肾脏的细菌负荷最重，随后感染逐渐减轻；通过 CLSM 精确观察到细菌在肾脏皮质的定殖，并定量分析不同时间点肾脏中定殖的细菌数。同时通过 CLSM 观察到在大肠杆菌 J96的作用下肾小管上皮细胞骨架的形态结构。结论成功建立荧光标记细菌感染的急性肾盂肾炎模型，确证细菌定殖于肾小管管腔内，细菌对肾小管上皮细胞间紧密连接蛋白具有破坏作用，为探讨急性肾盂肾炎的发病机制提供更直观的形态学依据。