【摘 要】
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目的：原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起＂分子开关＂的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法：根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列
【机 构】
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南京大学医学院免疫与生殖生物实验室,南京大学医药生物技术国家重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（批准号：30872941）
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目的：原癌基因Zbtb7A在肿瘤的发生发展过程中起＂分子开关＂的作用。本研究制备Zbtb7A蛋白POZ功能区重组蛋白及相应的多克隆抗体。方法：根据大肠杆菌的密码子偏好性,优化其编码序列,用2步法PCR合成目的片断,并将其构建入原核表达载体pET-26b（＋）中。重组表达质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）,用0.5 mmolIPTG诱导重组蛋白表达。所获重组表达蛋白经15%SDS-PAGE分离,切胶回收目的蛋白,研磨后免疫家兔制备抗血清。收集的抗血清经饱和硫酸铵沉淀和G蛋白柱联合纯化,用Western bl
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