观察新生大鼠肠道组织中肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid-binding protein, I-FABP)的表达情况,探讨I-FABP与新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis, NEC)的相关性。
方法24只2日龄无特定病原体级新生Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组(6只)和NEC模型组(18只)。通过连续3 d人工喂养+缺氧复氧+冷刺激+脂多糖灌胃(10 mg/kg)建立NEC模型,分别在造模成功后第1、2、3天随机选取6只大鼠空腹处死;空白对照组于NEC模型组造模成功后第3天空腹处死。处死后取大鼠回盲部肠管行组织病理评分,以及采用蛋白质印迹技术及免疫组织化学法检测回盲部肠组织I-FABP蛋白表达情况。采用单因素方差分析、LSD-t检验、Kruskal-Wallis H秩和检验、Mann-Whitney U检验,以及Pearson相关分析进行统计学分析。
结果NEC模型组大鼠全部顺利完成造模,造模过程中并无死亡,且肠组织病理学评分均≥2分,造模成功。NEC模型组造模后第1、2、3天体重增加[M(P25~P75)]均低于空白对照组[分别为1.00(0.48~1.35)与1.74(1.62~1.86) g,1.25(0.75~1.40)与2.61(2.53~2.99) g,1.35(0.88~1.48)与3.60(3.48~3.73) g,Z值分别为-2.898、-2.903及-2.892,P值均<0.05],但肠组织病理学评分均高于空白对照组[分别为2(2~3)、3(2~3)、4(3~4)与0(0~1)分,P值均<0.05],而NEC模型组造模后第3天大鼠肠组织病理评分显著高于造模后第1及第2天(P值均<0.05)。NEC模型组造模后第1、2、3天大鼠肠组织I-FABP表达水平及I-FABP阳性细胞数均高于空白对照组[I-FABP表达水平:0.179(0.179~0.186)、0.231(0.211~0.245)、0.202(0.192~0.225)与0.091(0.086~0.093);I-FABP阳性细胞数:59(55~60)、80(83~86)、80(84~88)与44(39~47)个;P值均<0.05],与造模后第1天相比,NEC模型组造模后第2及3天大鼠肠组织I-FABP表达水平及I-FABP阳性细胞数均较高(P值均<0.05)。蛋白质印迹技术与免疫组织化学法检测肠道组织I-FABP表达水平与肠道组织病理评分均呈正相关(r=0.932,95%CI:0.872~0.969;r=0.709,95%CI:0.484~0.872)。
结论I-FABP与NEC肠组织损伤程度存在相关性。