目的:筛选冻存人羊膜间充质干细胞效果较好的冻存液。方法:①不同配方的细胞冻存液对细胞冻存效果的影响。人羊膜间充质干细胞培养至第三代后分为10组,分别加入以下10种不同组成的冻存液。A组:70%DMEM/F12+20%胎牛血清+10%DMSO;B组:60%DMEM/F12+30%胎牛血清+10%DMSO;C组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%DMSO;D组:90%胎牛血清+10%DMSO;E组:70%DMEM/F12+20%胎牛血清+10%甘油;F组:60%DMEM/F12+30%胎牛血清+10%甘油;G组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%甘油;H:90%胎牛血清+10%甘油;I组:90%DMEM/F12+10%DMSO;J组:90%DMEM/F12+10%甘油。调整细胞密度为5×106mL-1,放入程序降温盒中,入-80℃低温冰箱保存。1个月后复苏,MTT法筛选出吸光光度值较高的一种冻存液。②相同血清含量细胞冻存液对细胞冻存效果的影响。含体积分数为50%胎牛血清的细胞冻存液分3组保存细胞。K组:45%DMEM/F12+50%胎牛血清+5%DMSO;L组:40%DMEM/F12+50%胎牛血清+10%DMSO;M组:35%DMEM/F12+50%胎牛血清+15%DMSO;复苏冻存的细胞后,将细胞按冻存前的数量调整至5×105mL-1,台盼蓝染色后,计算细胞的成活率。在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状况。结果及结论:配方为45%DMEM/F12+50%胎牛血清+5%DMSO的冻存液冻存复苏人羊膜间充质干细胞后细胞的成活率最高(P<0.05);冻存复苏后细胞的生长状况较好。