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为了解丙型肝炎病毒（HCV）基因调控方式、探索反义寡脱氧核苷酸对丙型肝炎病毒基因表达的体外抑制作用。构建了由HCV 5’非翻译区（5’UTR）翻译启动报道基因——虫荧光素酶（luc）基因的真核表达载体；人工合成了针对HCV 5’UTR及非结构蛋白5（NS5）区的反义寡脱氧核苷酸（ODN）。借助脂质体将ODN分别与所构建的载体一同转染人肝癌细胞系，短期培养后制备细胞提取液，以荧光发光法检测luc基因的表达。结果发现：两个针对HCV 5’UTR的ODN均可抑制luc基因的表达，其中与启动密码子上游序列（-21～-2）互补的反义ODN的作用更为明显，且呈剂量依赖性；与NS5区互补的ODN不具有这种作用。本研究提示，HCV5’UTR尤其是启动密码子上游序列对于其履行翻译启动功能至关重要。人工合成的反义ODN能够在细胞水平有效抑制HCV基因的表达。