脊髓灰质炎病毒cDNA转染哺乳动物细胞的研究

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:byang1234
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用带脊髓灰质炎病毒(Polio-virus)Ⅰ型Mahoney株的cDNA质粒转染HeLa细胞后,产生完整病毒颗粒。实验采用了DEAE-Dextran转染法,将环状pSV202质粒导入HeLa细胞中,5天后细胞发生肿胀,变圆,产生典型细胞病理效应,所释放出的病毒颗粒经电镜检查,具有典型Polio病毒形态学特征,中和试验和免疫电镜均证实为Polio Ⅰ型病毒。温度特征结果表明与亲本Mahoney株性质一致,但形成的蚀斑形态不同于亲本株。用限制性内切酶消化质粒后不能转染细胞。

其他文献
1988年12月和1989年11月收集东海县人工饲养的紫貂肺252只,用免疫荧光(IFAT)技术检出流行性出血热病毒(EHFV)抗原阳性10只,阳性率3.97%。并从EHFV抗原阳性的貂肺中分离到2株EHFV,从而首次证实了人工饲养的紫貂可自然感染EHFV。人工饲养的紫貂喜食鼠类,与人群接触密切,提示其作为EHF的宿主动物及其流行病学作用不可忽视。
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流行性出血热(简称出血热)病人常有血清谷丙转氨酶(ALT)值升高,但持续时间短暂,至病程的恢复期多已正常。本文主要以肝活检病理改变探求与临床和ALT的关系。结果表明,出血热患者ALT值升高占34/41(82.93%)。42例肝组织(肝活检38例,死后肝穿刺4例)光学显微镜检查综合有肝细胞变性和/或坏死者共41例(97.62%),肝窦受压变窄39例(92.85%),肝窦内皮细胞肿胀、部分肝窦扩张充血
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用聚乙二醇(PEG)沉淀流行性出血热(EHF)病人血清循环免疫复合物(CIC),然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝脱柱(SBA)进一步纯化CIC,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹法(Western blot)检测CIC中EHF病毒的特异性多肽成分。此外,对纯化的CIC应用聚合酶链反应(PCR)方法从分子水平证实其特异性。将PCR产物作DNA琼脂凝胶电泳,从DNA区带位置证实
用血红蛋白酶释放法(Hb-ERA)对96例流行出血热(EHF)患者的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)加以检测,分析了EHF患者ADCC活性的变化及其与病情发生发展之间的关系。结果发现EHF患者发病初期ADCC活性增高,而其余各期却有不同程度的下降,上述结果证实EHF患者病程中有杀伤细胞(K)功能失常之现象。
1985~1990年广州市发生以发热、头痛、乏力、皮疹、出血等临床症状的疾病流行。采集病人血清和捕捉蚊媒,用C6/36白纹伊蚊细胞系分离病毒和血清学检测,结果,1985年分离得5株病毒,1986年30株,1987年9株,1990年12株。应用抗登革病毒单克隆抗体间接免疫荧光法、补体结合试验和双份血清抗体检测进行鉴定,1985年分离的病毒株为1型登革(DEN)病毒,1986~1987年为2型DEN病
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用辛酸法、硫酸铵法,DEAE-32纤维素柱层析方法纯化小鼠抗乙型脑炎(乙脑)病毒单克隆抗体(McAb)51-8,治疗小鼠乙脑模型。提纯后的McAb在10-3稀释时(1ml腹水提纯后用生理盐水稀释到原体积1ml).辛酸法提纯的McAb与原腹水McAb均能保护90%的小鼠免受乙脑病毒感染;硫酸铵提纯的McAb能保护50%的小鼠;DEAE-32柱层析法用0.1MNaCl洗脱的McAb在10-2稀释时能保