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目的
评估生长抑素(SST)联合顺铂(DDP)对胆囊癌(GBC)细胞生长的协同抑制作用及分子机制。
方法免疫组化方法检测PTEN蛋白在GBC组织中的表达；CCK-8法检测SST联合DDP对GBC细胞GBC-SD和SGC996体外增殖的影响，并通过等效法分析两种药物的协同作用；裸鼠荷瘤模型评估药物处理后细胞体内增殖；Annexin V/PI双染法检测SST联合DDP对细胞凋亡的影响；组织活性氧荧光定量(DCFH-DA)法检测药物处理后细胞内氧化应激活性氧(ROS)的水平变化；JC-1法检测药物处理后细胞线粒体膜电位变化；蛋白印迹(Western blot)法检测药物处理后细胞内PTEN、p-AKT等蛋白表达水平变化。
结果PTEN蛋白在GBC组织中表达异常降低，且表达水平与肿瘤分化程度呈负相关，与患者生存期呈正相关。DDP可以降低细胞内PTEN蛋白表达水平，SST作用与之相反，两者联合可以发挥协同抑制作用，并且能够显著抑制裸鼠荷瘤组织的生长。SST和DDP均能诱导细胞凋亡，且两药联合的凋亡诱导作用更显著。SST可以抑制AKT信号通路激活，但并不诱导ROS生成。DDP作用与之相反。两者均能诱导线粒体细胞色素C(cytochrome C)释放，激活caspase-3。
结论SST通过诱导PTEN蛋白表达增强DDP对GBC细胞生长的抑制作用，二者联合用药有望成为今后临床GBC患者化疗的选择之一。