【摘 要】
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目的：构建干扰素β1a（IFN-β1a）的CHO表达体系,探讨人IFN-β1a在真核细胞中的表达效果。方法：采用全基因合成法获取重组人IFN-β1a基因,并通过点突变将IFN-β1a的17位半胱氨酸进
【机 构】
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深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院,吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室,吉林大学药学院基因工程教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助课题（21072075 20772046）
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目的：构建干扰素β1a（IFN-β1a）的CHO表达体系,探讨人IFN-β1a在真核细胞中的表达效果。方法：采用全基因合成法获取重组人IFN-β1a基因,并通过点突变将IFN-β1a的17位半胱氨酸进行修饰,合成的基因经PCR扩增,连接入pSV2-dhfr质粒中,构建重组真核表达质粒pSV2-dhfr-IFN-β1a。将质粒转染至CHO-dhfr-细胞中,经MTX加压筛选,获得稳定生长的能够持续表达IFN-β1a的单克隆细胞株;提取细胞基因组DNA,进行PCR鉴定。收集细胞培养上清液,采用Wish细胞病变
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