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目的
探索miR-125a-5P在髓母细胞瘤表皮生长因子受体(EGFR)信号通路中的调控机制。
方法利用TargetScan和Sanger软件在EGFR信号通路中预测miR-125a-5P的潜在靶点，脂质体介导细胞基因转染，共分3组：对照组、无义组和miR-125a-5P组。荧光素酶实验验证miR-125a-5P与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂-2B(CDKN2B)、E2F转录因子3(E2F3)、丝裂原活化蛋白激酶-14(MAPK14)和生长因子受体结合蛋白-10(GRB10)间的靶矢关系；转染髓母细胞瘤D341细胞miR-125a-5p寡核苷酸，反转录聚合酶链反应检测D341细胞中miR-125a-5p的表述水平，噻唑蓝法绘制细胞生长曲线，Transwell实验检测瘤细胞迁移能力，Western blot法检测GRB10、EGFR、磷脂酰肌醇-3-羟基激酶(PI3K)和Ras的蛋白表达水平。
结果荧光素酶实验结果显示，GRB10是所检测基因中唯一的miR-125a-5P靶基因；获得miR-125a-5P转染后D341细胞增殖速度减慢。miR-125a-5P组的细胞迁移率与对照组[(38.16±7.47)%]和无义组[(36.79±8.94)%]比较，miR-125a-5P组最低[(13.59±4.41)%]，3组间比较有统计学差异(χ2＝11.495，P<0.05)。miR-125a-5P转染可致EGFR蛋白表达水平升高1.67倍，GRB10、PI3K和Ras的水平分别降低至23%、61%和42%。
结论miR-125a-5P通过靶向沉默GRB10的表达抑制髓母细胞瘤EGFR下游信号通路，发挥肿瘤生长抑制作用。