【摘 要】
：
目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)或消退素D1(RvD1)抑制过氧化氢(H2O2)诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者原代气道上皮细胞(DHBE)炎症反应和黏液高分泌的分子机制.方法 DHBE细胞的分离、鉴定和培养,以最佳H2 O2浓度刺激DHBE细胞制备体外氧化应激模型,利用NAC和RvD1进行干预.采用免疫荧光技术、流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;Western blot检测IKKβ 和NF-κB蛋白表达及磷酸化水平;qRT-PCR和ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL
【机 构】
：
安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科,合肥 230022;安徽医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科,合肥 230022;气道疾病研究与医学转化安徽省重点实验室,合肥 230022
论文部分内容阅读
目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)或消退素D1(RvD1)抑制过氧化氢(H2O2)诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者原代气道上皮细胞(DHBE)炎症反应和黏液高分泌的分子机制.方法 DHBE细胞的分离、鉴定和培养,以最佳H2 O2浓度刺激DHBE细胞制备体外氧化应激模型,利用NAC和RvD1进行干预.采用免疫荧光技术、流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;Western blot检测IKKβ 和NF-κB蛋白表达及磷酸化水平;qRT-PCR和ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8的表达水平;qRT-PCR和免疫荧光技术检测黏蛋白5AC(MUC5AC)表达水平.结果 与对照组比较,H2 O2刺激DHBE细胞后,ROS表达水平升高(P<0.05),p-IKKβ和p-NF-κB表达呈浓度依赖性升高(P<0.05),细胞内TNF-α、IL-8 mRNA水平及细胞培养上清液中TNF-α、IL-8蛋白水平增多(P<0.05),MUC5AC的表达量增多(P<0.05).NAC或RvD1抑制H2 O2诱导的TNF-α、IL-8和MUC5AC的表达(P<0.05).结论 NAC、RvD1可能通过NF-κB信号通路在氧化应激对DHBE细胞炎症和黏液高分泌反应中发挥保护效应.
其他文献
目的 研究lncRNA SIL与肺纤维化过程中肺泡上皮细胞的增殖和迁移之间的关系.方法 利用RNA fish研究在转化生长因子(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞向间质细胞转化的过程中lncRNA SIL的表达变化,构建lncRNA SIL真核表达载体,转染A549细胞后,通过RT-PCR、MTT、Western blot、细胞损伤修复以及免疫荧光实验检测过表达lncRNA SIL对细胞A549增殖和迁移的作用以及对相关标志蛋白表达的影响.结果 当使用TGF-β1诱导48 h后,细胞中ln-cRNA SIL的
目的 制备细胞外囊泡(EVs)共载体系,以协同递送肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)/维替泊芬(VPF)组合用于诱导口腔鳞癌细胞凋亡及增殖抑制.方法 通过超速离心、过滤法分离纯化TRAIL/VPF共载EVs(MSCT-EVs/VPF).通过BCA法检测CD63、CD9和TRAIL表达,确认EVs来源.用高效液相法检测VPF载药量,绘制体外释放曲线.使用MTT法检测细胞毒性和半数抑制浓度(IC50).通过流式细胞仪检测细胞凋亡,最后Western blot被用于检测MSCT-EVs/VPF对SCC2
目的 探讨高尿酸对心肌细胞糖代谢、胰岛素抵抗的影响及其可能分子机制.方法 将大鼠H9 c2心肌细胞暴露于高尿酸环境,胰岛素刺激下荧光葡萄糖2-NBDG标记心肌细胞葡萄糖摄取,通过倒置荧光显微镜及流式细胞仪检测心肌细胞对葡萄糖的摄取及心肌细胞内活性氧生成;蛋白印迹分析检测磷酸化胰岛素受体底物1(IRS1,Ser307)和磷酸化Akt(Ser473)水平;动物模型上,检测高尿酸对胰岛素抵抗、心肌组织胰岛素信号通路相关蛋白表达的影响.结果 高尿酸显著抑制心肌细胞对葡萄糖的摄取,抗氧化剂NAC可恢复心肌细胞对葡萄
目的 探究一种新型MEK 1/2抑制剂(R)-3-(2,3-二羟丙基)-6-氟-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-8-甲基吡啶[2,3-d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮(TAK-733)对人甲状腺乳头状癌(PTC)人甲状腺乳头状癌(TPC)-1细胞生物学行为的影响.方法 取生长状态良好,处于对数生长期的TPC-1细胞,将其随机分为2.5、5、10μmol/L组和对照组,各组分别作用24、48、72 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖能力.各组分别作用24、48 h,利用流式细胞仪检测细
目的 分析结核性胸膜炎患者伴发胸膜结核瘤的影响因素,为患者治疗方案制定提供科学依据.方法 选取结核性胸膜炎患者作为研究对象,根据是否伴发胸膜结核瘤将所有研究对象分为病例组和对照组.使用自制调查问卷收集患者的临床资料和实验室指标.结果 共纳入了276例结核性胸膜炎患者,年龄(39.22±18.12)岁,其中84例患者伴发了胸膜结核瘤.单因素分析结果显示,结核性胸膜炎患者积液量、注入尿激酶以及使用糖皮质激素是患者发生胸膜结核瘤的影响因素(P<0.05).进一步的多因素分析结果显示,胸腔积液含量、注入尿激酶以及
目的 探讨孕期缺氧对成年雄性子代大鼠肺动脉血管功能的影响及机制.方法 将清洁级Sprague-Dawley孕鼠随机分为缺氧组和对照组.缺氧组孕鼠在孕期第10～20天放入缺氧箱(10.5％氧气和89.5％氮气)中;对照组孕鼠在常氧下饲养(21％氧气).两组孕鼠第21天取出后自然分娩,断奶后将雄性子代饲养至4月龄.4月龄雄性子代大鼠用4％水合氯醛麻醉,分离出肺动脉进行血管功能和分子生物学等相关实验.结果 与对照组相比,缺氧组大鼠肺动脉对苯肾上腺素(PE)诱导的收缩反应减弱(P<0.001);而乙酰胆碱(ACH
目的 基于网络药理学方法初探葛花解酒涤脂汤(GJDD)治疗酒精性脂肪肝(AFLD)的潜在活性化合物及其可能的作用靶点.方法 建立GJDD药物-化合物数据集、化合物-靶点数据集、AFLD靶点数据集,构建GJDD抗AFLD的“中药-化合物-靶点”交互网络图,并通过Cyto-scape软件对网络进行分析,初探GJDD抗AFLD的潜在活性化合物及其可能的作用靶点.结果 GJDD可能作用于PIK3CA、PIK3R1、MAPK1、APP等靶点,并通过炎症相关信号通路、激素相关通路、凋亡相关信号通路等多条通路达到其治疗
目的 运用能谱CT多参数成像对克罗恩病(CD)爬行脂肪进行定量分析,探讨其与患者炎症活动度之间的关系.方法 对127例接受能谱CT扫描的CD患者进行回顾性分析.通过经典的临床CDAI评分来评估患者的炎症活动度,并分为缓解组、轻度组和中重度组.测量并计算病变肠段爬行脂肪的能谱曲线斜率(λHU)、标准化碘浓度(NIC)以及标准化水浓度(NWC),采用CT后处理工作站测量患者的内脏脂肪面积(VFA)及皮下脂肪面积(SFA).分析爬行脂肪定量数据与CD炎症活动度之间的关系.结果 CD患者中重度组的λHU、NIC、
目的 探讨circFAT1在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表达情况及沉默circFAT1对NSCLC细胞A549增殖和侵袭力的影响.方法 选取行手术切除治疗的NSCLC患者107例,RT-qPCR检测NSCLC和癌旁组织中circFAT1表达,培养A549细胞,分别转染siRNA-circFAT1(si-circFAT1组)、无关序列(si-control组),另外设未转染细胞作为空白组(blank组),RT-qPCR检测细胞中circFAT1表达量,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell小室检
目的 探究6-姜酚通过调节Wnt/β-catenin信号通路对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠细胞凋亡、氧化应激和神经炎症的影响.方法 通过在大鼠双侧大脑的海马体注射Aβ构建AD大鼠模型.大鼠被随机分为6组:对照组、模型组、低剂量6-姜酚组(50 mg/kg)、中剂量6-姜酚组(75 mg/kg)、高剂量6-姜酚组(100 mg/kg)和阳性对照组(盐酸多尼哌齐0.9 mg/kg).通过神经损伤评分评估大鼠神经损伤程度,干/湿法检测脑含水量,HE染色检测海马体组织学损伤程度.流式细胞术