【摘 要】
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目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂(HDACI)对内毒素所致血管内皮细胞损伤的影响,为临床脓毒症相关血管内皮细胞损伤后的保护提供实验依据.方法 体外培养血管内皮细胞特
【机 构】
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首都医科大学附属北京友谊医院重症医学科
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目的 探讨组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂(HDACI)对内毒素所致血管内皮细胞损伤的影响,为临床脓毒症相关血管内皮细胞损伤后的保护提供实验依据.方法 体外培养血管内皮细胞特性的EAhy926细胞株.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同剂量脂多糖(LPS,50、100、500、1 000 ng/ml)对血管内皮细胞的增殖作用.选择细胞存活率较高的LPS剂量,加入100 μ g/ml HDACI曲古抑霉素(TSA),采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测LPS刺激内皮细胞3、6、9、12、24 h时细胞内Toll样受体4(TLR4)和HDAC2的蛋白表达.结果 与空白对照组比较,100 ng/ml LPS刺激内皮细胞9、12、24 h后,TLR4蛋白表达明显上调(1.01±0.14、1.25±0.16、1.20±0.19比0.34±0.05,均P＜0.01)；刺激12h、24h时HDAC2蛋白表达有所上调(1.14±0.10、1.20±0.04比0.17±0.02,均P＜0.01).与LPS组相比,TSA组刺激12 h时TLR4蛋白表达明显下调(0.37±0.07比1.25±0.16,P＜0.05),24 h时TLR4蛋白表达无明显差异(0.37土0.10比1.20±0.19,P＞0.05)；TSA组各时间点HDAC2蛋白表达下调,未见条带显现.结论 LPS刺激血管内皮细胞后可上调内皮细胞TLR4及HDAC2的蛋白表达；而TSA可以下调LPS刺激内皮细胞后的TLR4表达.
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